HIF-1α对BMP2诱导干细胞成软骨、成骨分化的影响的研究

发布时间：2017-06-15 13:12

本文关键词：HIF-1α对BMP2诱导干细胞成软骨、成骨分化的影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨了低氧通路中的关键转录调控因子低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α，，HIF-1α）对骨形态发生蛋白2（bonemorphogenetic protein2，BMP2）诱导干细胞成软骨分化以及成骨分化的影响，阐明HIF-1α在干细胞软骨、成骨分化中的作用。方法：构建及扩增相应腺病毒AdBMP2、AdHIF-1α、AdGFP，感染目的干细胞珠C3H10T1/2；RT-PCR验证目的基因的表达；Westernblot检测了成软骨分化、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达；Real-time PCR法检测成软骨、成骨分化标志物COL2A1、aggrecan、COL1A1和ALP的mRNA表达；Alcian blue、ALP（alkalinephosphatase，ALP）及Alizarin red S染色分别检测软骨细胞外基质、碱性磷酶活性及骨基质钙盐沉积情况；并且在体外实验了解HIF-1α对BMP2诱导胎鼠肢芽骨骼发育过程中的影响；且进行干细胞裸鼠皮下移植，观察不同处理组所形成骨块的组织结构情况。结果：HIF-1α明显增加了BMP2诱导的Sox9以及下游COL2A1、aggrecan等成软骨分化相关基因的表达，抑制了BMP2诱导的Runx2及其下游基因COL1A1、ALP等成骨分化相关基因的表达；Alcian blue染色结果显示HIF-1α促进了软骨细胞外基质的分泌，ALP染色及茜素红染色提示HIF-1α抑制了ALP的活性及骨基质钙盐沉积；同时抑制了BMP2诱导的胎鼠肢芽内软骨增生区向肥大区的转化，进而抑制了肢芽骨骼中软骨内骨化过程；体内试验中，HIF-1α明显增强了BMP2诱导干细胞软骨分化及软骨结构的形成，抑制了干细胞成骨分化及软骨内骨化。结论：HIF-1α明显增强了BMP2诱导的干细胞成软骨分化，抑制了成骨分化及软骨内骨化过程，维持了软骨表型。
【关键词】：低氧诱导因子-1α 骨形态发生蛋白2 干细胞 软骨分化 成骨分化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
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