TLR7在呼吸道合胞病毒感染A549细胞诱导Ⅰ型干扰素中的作用
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【摘要】:目的探讨Toll样受体7(TLR7)在呼吸道合胞病毒(RSV)感染A549细胞诱导产生I型干扰素(IFN)抗病毒免疫反应中的作用。方法实验分正常对照组、RSV感染组、TLR7 siRNA沉默组,分别于感染的4、8、12、24 h后收集各组细胞以及培养上清液。TLR7 siRNA通过瞬时转染A549细胞,半定量RT-PCR法检测TLR7基因沉默效果;TRIzol试剂提取细胞总RNA,检测TLR7、干扰素调节因子7(IRF7)、IFN-α、IFN-β的mRNA表达量变化;通过Western blot法检测TLR7蛋白表达量;ELISA法检测感染不同时间点A549细胞培养上清液中IFNα/β含量的变化。结果 1转染24h后TLR7 siRNA-2有效抑制TLR7 mRNA表达;2 RSV感染A549细胞后,TLR7、IRF7、IFN-α/β的mRNA以及TLR7蛋白的表达量均升高,并与RSV感染之间存在时间依赖性关系;沉默TLR7后,TLR7、IRF7、IFN-α/β的mRNA以及TLR7蛋白的表达量较感染组均有明显下降;3 RSV感染A549细胞后,明显上调细胞培养上清液中IFN-α/β的水平,TLR7siRNA沉默组IFN-α/β的表达水平较RSV感染组均下降,差异有统计学意义,且IFN-α的表达量下调更为显著。结论RSV感染A549细胞后,TLR7被活化能够诱导产生I型IFN,发挥抗病毒作用,且TLR7诱导产生的I型IFN以IFN-α为主。
【作者单位】: 安徽医科大学基础医学院生物学教研室;安徽医科大学生命科学学院;
【关键词】: 呼吸道合胞病毒 A细胞 Toll样受体 siRNA Ⅰ型干扰素
【基金】:安徽高校省级自然科学研究重点项目(编号:KJ2012A152) 安徽省自然科学基金(编号:1308085MH129) 安徽省级大学生创新创业训练计划项目(编号:AH201410366135)
【分类号】:R373
【正文快照】: 2015-06-20接收呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是一种有包膜单负链的RNA病毒,属于副黏病毒科肺炎病毒属[1],是世界范围内婴幼儿严重下呼吸道感染(包括肺炎和细支气管炎)的最常见病原体[2-3]。目前RSV感染的病理机制尚不明确,迄今仍无理想的治疗药物和疫苗。
【参考文献】
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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2 孙晓东;王s
本文编号:456899
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