二阶段模式化学诱发小鼠肝癌模型的建立与优化

发布时间：2017-06-20 23:00

  本文关键词：二阶段模式化学诱发小鼠肝癌模型的建立与优化，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨采用DEN大剂量激发为启动剂,CCl4、乙醇、乙硫氨酸作为促癌剂,联合配伍为不同诱导方案建立二阶段模式的BALB/c小鼠肝癌模型,并试图找到一个最佳的优化造模方案。 方法：230只雄性BALB/c小鼠动物随机分为6组：DEN+CCl4组50只、DEN+CCl4+乙醇组50只、DEN+CCl4+乙硫氨酸组50只、DEN+乙硫氨酸组30只、DEN+乙硫氨酸+乙醇组30只和正常对照组20只。DEN+CCl4、 DEN+CCl4+乙醇、DEN+CCl4+乙硫氨酸三组小鼠首先按100mg/kg体重腹腔注射DEN两次,第3周开始后,灌胃20%CCl4橄榄油溶液(0.1ml/10g,2次／周),第8周20%CCl4橄榄油溶液加量到0.12ml/10g；DEN+CCl4+乙醇组小鼠加予含10%乙醇饮水自由饮用；DEN+CCl4+乙硫氨酸组小鼠则灌胃DL-乙硫氨酸(150mg/kg,2次／周)。DEN+乙硫氨酸、DEN+乙硫氨酸+乙醇两组小鼠首先按上述方法予DEN,第三周后均灌胃DL-乙硫氨酸(150mg/kg,2次／周),而DEN+乙硫氨酸+乙醇组同时供10%乙醇饮水自由饮用；诱癌药物均持续给药至18周。正常对照组仅给予正常的饲料及饮用灭菌普通水。实验共进行20周。于第4、6、8、10、12、14、16、18周随机处死各组小鼠3只,至20周全部处死,获取相关组织常规制作病理切片观察肝癌发生情况和RT-PCR检测诱癌20周后各组AFP基因的表达情况。 结果：在整个诱癌过程中,正常对照组小鼠生长状况良好,无自然死亡,肝脏未见异常。所有实验组小鼠与正常对照组小鼠一样体重都有所增长,但在诱癌20周时,DEN+CCl4+乙醇组小鼠体重和肝绝对重量均低于其他实验组(P0.05)。实验组DEN+CCl4、DEN+CCl4+乙醇和DEN+CC14+乙硫氨酸三组小鼠均成功诱发肝癌,癌变过程大致经历了肝细胞损伤-修复期、增生-硬化期和肝细胞癌变等三个阶段,与人肝癌的发生发展及病理学变化相似,其中以DEN+CC14+乙醇组肝脏病变最为明显。DEN+CCl4组、DEN+CCl4+乙醇组、DEN+CCl4+乙硫氨酸组、DEN+乙硫氨酸组、DEN+乙硫氨酸+乙醇组、对照组成癌率分别为33.3%(7/21)、80%(16/20)、36.4%(8/22)、0%(0/16)、0%(0/16)和0%(0/8)。诱发的肝癌主要为肝细胞肝癌,以高中分化为主。DEN+CCl4组与DEN+CCl4+乙醇组肺转移发生率分别为14.3%(1/7)、31.2%(5/16)。其他组并未发生肺转移现象。经RT-PCR检测,在DEN+CCl4、DEN+CCl4+乙醇及DEN+CCl4+乙硫氨酸三组诱癌20周的肝癌组织中AFP基因表达与妊娠1周的胎肝组织一样高表达,在转移的肺组织上也有少量AFP基因的表达,而DEN+乙硫氨酸组、DEN+乙硫氨酸+乙醇和正常组肝组织中均未见AFP基因表达。 结论：采用DEN启动,CCl4/乙醇连续促进的方法诱导的二阶段BALB/c小鼠肝癌模型操作简便,成瘤期短,癌变率高,与人类肝癌发生发展相似,是研究肝癌较为理想的实验动物模型。
【关键词】：肝肿瘤 动物模型 小鼠 二乙基亚硝胺 四氯化碳 乙醇 乙硫氨酸
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R735.7;R-332
【目录】：

• 英汉缩略一览表4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-13
• 材料和方法13-23
• 结果23-36
• 讨论36-44
• 结论44-45
• 参考文献45-49
• 综述49-60
• 参考文献57-60
• 攻读硕士学位期间文章发表情况60-61
• 致谢61

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 段小娴，覃柳亮，覃国忠，严瑞琪;单剂量黄曲霉毒素B_1致大鼠肝癌作用的短期实验模型[J];癌症;1996年01期

2 任传路;季健;沈红石;刘厚奇;;转录因子GATA4和甲胎蛋白在小鼠胎肝和肝癌细胞中的表达对比及相关性[J];第二军医大学学报;2007年12期

3 张志敏;王阁;陈川;许文;李琼;胡庆;王东;李增鹏;;改进性DEN诱发大鼠肝癌模型的建立与病理形态学研究[J];第三军医大学学报;2007年12期

4 谢胜学;许戈良;荚卫东;王志华;马金良;葛勇胜;;二乙基亚硝胺联合N-亚硝基吗啉诱导大鼠肝癌模型的实验病理研究[J];肝胆外科杂志;2008年02期

5 刘勇;赛岩;刘冬梅;刘杨;文川;范礼斌;崔春萍;;小鼠原发性肝癌短期诱导模型的建立和评价[J];军事医学;2011年03期

6 王吉耀,涂传涛;酒精性肝病的发病机制[J];临床内科杂志;2004年02期

7 程延安,袁利超,党双锁,陈云茹,张正国;间断小剂量DEN诱发大鼠肝癌模型研究[J];肿瘤防治杂志;2005年11期

8 党双锁,袁利超;肝癌动物模型的研究现状[J];世界最新医学信息文摘;2004年01期

9 徐新保,冷希圣,杨晓;四氯化碳/乙醇诱导129/Sv小鼠产生原发性肝细胞癌模型的建立[J];消化外科;2005年01期

10 肖祖刚;余径松;张俊艳;汤祥军;金妙全;朱名安;;四氯化碳／乙醇在小鼠原发性肝癌模型中的应用及其作用机理的探讨[J];医学动物防制;2006年03期

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本文编号：467038