RNA干扰血管紧张素原基因表达对前脂肪细胞3T3-L1分化的影响

发布时间：2017-06-22 09:10

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【摘要】：目的:构建靶向血管紧张素原(AGT)基因的RNA干扰质粒,研究AGT基因对鼠前脂肪3T3-L1分化的影响。方法:设计靶向AGT的小分子RNA干扰片段(AGT-shRNA),以未靶向任何DNA的小分子RNA(Non-shRNA)为对照,利用载体psiRNA-U6.1/Neo构建重组表达质粒,转染鼠前脂肪细胞3T3-L1并筛选到稳定转染细胞株,RT-PCR和SDS-PAGE法分别检测AGT基因沉默效果,通过显微镜观察和脂肪细胞分化标志物检测来确定AGT基因干扰对3T3-L1细胞分化的影响。结果:成功构建AGT干扰质粒,与对照组比较,AGT基因转录水平受到显著抑制(P0.05),AGT蛋白表达水平也仅为对照的43.86%。AGT基因干扰后3T3-L1细胞脂质水平和甘油-3-磷酸脱氢酶(GPDH)活性仍随分化时间延长呈上升趋势,但增长量明显低于对照组(P0.05)。结论:RNA干扰AGT基因可明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,提示脂肪组织中的肾素-血管紧张素系统(RAS)与脂肪代谢有重要关联。
【作者单位】： 深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院;华南理工大学生物科学与工程学院;
【关键词】： 血管紧张素原 RNA干扰 T-L 分化
【基金】：广东省教育厅产学研结合项目资助课题(2012B091100408) 深圳市科技计划项目资助课题(07KJba160) 广东省深圳市创新委新兴产业公共技术服务平台项目资助课题(GGJS20130331152344401)
【分类号】：R33
【正文快照】： 肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensinsystem,RAS)是人体内重要的体液调节系统,对稳定心血管系统功能、维持体液平衡和调节血压有重要作用,与高血压和糖尿病等疾病关系密切[1]。在RAS中,血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)是产生具有生物活性血管紧张素的前体物质,其在肾素

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本文编号：471341