硫化氢保护被ATP损伤的PC12细胞

发布时间：2017-06-23 05:11

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【摘要】：目的:观察硫化氢的供体硫氢化钠(Na HS)对三磷酸腺苷(ATP)诱导的PC12细胞活力、胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)及膜通透性的变化,探讨硫化氢神经保护作用的嘌呤信号机制。方法:将对数生长期高分化的PC12细胞,随机分为4组,分别为(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理;(2)ATP组:接种细胞24 h后ATP处理;(3)Na HS+ATP组:Na HS预先孵育30 min后再用ATP处理,并且Na HS始终存在于反应体系中;(4)KN-62(P2X7受体阻断剂)+ATP组:KN-62预先孵育30 min,其余同Na HS+ATP组。MTT检测各组细胞活力,Fura-2/AM荧光染料检测各组[Ca2+]i,检测荧光染料YO-PRO-1的相对荧光单位以反映膜的通透性。结果:(1)0.3mmol/L ATP对细胞活力无影响,但1、3、5、10 mmol/L ATP则呈浓度依赖式明显降低细胞活力,200μmol/L Na HS干预可明显逆转ATP引起的细胞活力下降(P0.05),而800μmol/L Na HS预处理则加剧ATP对PC12细胞的损伤(P0.05)。(2)ATP处理PC12细胞会引起[Ca2+]i迅速升高并且呈浓度依赖性,Na HS预处理能对抗ATP引起的[Ca2+]i升高(P0.05)。(3)随着ATP浓度的增加及作用时间的延长,PC12细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,Na HS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取(P0.05)。结论:硫化氢可保护ATP损伤的PC12细胞,可能与其抑制[Ca2+]i升高和YO-PRO-1荧光增强有关。
【作者单位】： 新乡医学院生理学与神经生物学教研室;新乡医学院附属中心医院;新乡医学院第三附属医院;新乡医学院第二附属医院;沁阳市人民医院神经内科;
【关键词】： 三磷酸腺苷 硫化氢 嘌呤PX受体 PC细胞
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81371346;No.81271376) 新乡医学院2013年度研究生科研创新支持计划资助项目(No.YJSCX201318Y)
【分类号】：R363
【正文快照】： 近年来三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)-P2X嘌呤信号途径在脑缺血-再灌注损伤中的作用逐渐受到关注,而对P2X7受体亚型的研究则成为焦点。在正常生理状态下,ATP作用于P2X7受体并将其激活,引起Ca2+和Na+内流,K+外流,细胞去极化。而在脑缺血-再灌注损伤时,损伤的神经元和

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本文编号：474010