获能培养液等因素对遗传工程小鼠冻融精子体外受精率的影响

发布时间：2017-06-25 03:07

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【摘要】：目的探讨遗传工程小鼠精子冷冻、复苏及体外受精率的效果,建立简便、经济的遗传工程小鼠保种体系。方法采用精子冷冻、体外受精和胚胎移植技术,比较了精子获能培养液、雄鼠周龄及精子冻存液等因素对于遗传工程小鼠精子冷冻保存的影响。结果用CPA精子冻存液冷冻保存精子,精子复苏后用PM精子培养液获能培养,体外受精率在82.49%~91.43%,而HTF精子培养液的体外受精率为14.46%~27.38%,同品系间差异极显著(P0.01);10~35周龄的雄鼠精子均能成功冷冻、受精,移植后产仔;使用R18S3,CPM,CPA三种不同精子冻存液冷冻遗传工程小鼠精子,复苏后采用PM精子培养液体外受精,受精率分别是75.85%、88.89%和94.27%,移植后得到阳性小鼠;体外受精后的胚胎成功冷冻保存,移植后产仔。结论采用CPA精子冻存液冷冻保存精子,精子复苏后用PM精子培养液体外受精,能够更有效地保存遗传工程小鼠。
【作者单位】： 中国食品药品检定研究院国家啮齿类实验动物种子中心;北京百奥赛图基因生物技术有限公司;
【关键词】： 精子 冷冻保存 体外受精 胚胎移植 遗传工程小鼠
【基金】：国家科技支撑计划(2013BAK11B00)
【分类号】：R321.1
【正文快照】： 。CRISPR-Cas技术的发展,有效补充了锌指核酸酶技术(ZFN)、胚胎干细胞打靶和TALEN等制作动物模型方法,将会更有效、更快地研发出遗传工程小鼠[1]。随着这些基因工程技术的不断发展和完善,遗传工程小鼠越来越多的应用于生命科学研究中,已渗透到医学、发育生物学、遗传学、动物

【参考文献】

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