动态观察高脂性大鼠早期脂肪肝血浆CD62p的表达及与血瘀证的关系

发布时间：2017-06-28 13:09

  本文关键词：动态观察高脂性大鼠早期脂肪肝血浆CD62p的表达及与血瘀证的关系，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]本课题研究以血小板活化的特异性指标CD62p作为切入点,建立早期脂肪肝大鼠模型,动态观察高脂性大鼠早期脂肪肝血浆CD62p的表达,探索早期脂肪肝、血小板活化与血瘀证的关系。从“血瘀”角度阐明早期脂肪肝的中医证治规律,为中医临床治疗非酒精性脂肪肝提供理论依据,亦为实验研究奠定基础。 [方法] SD雄性大鼠160只,随机分为5组,正常A组50只,正常B组20只,模型A组50只,模型B组20只,用药组20只。于4、6、8周末随机剖杀正常A组、模型A组大鼠各10只。第8周末开始予正常B组、模型B组生理盐水灌胃,用药组予膈下逐瘀汤灌胃,灌胃量为1ml/200g,每日1次。于10、12周末剖杀5组大鼠各10只。分别于5个时间点称取大鼠体重、抽取大鼠血样后剖取肝组织后,称取大鼠肝湿重,计算肝/体比指数。做肝脏病理切片观察大鼠肝细胞脂肪变化判断模型复制成功与否。用酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测5个时间点的大鼠血浆可溶性P-选择素(CD62p)的含量,同时做血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血脂、肝脂、血小板聚集率的测定。 [结果] 1.一般情况：前4周正常组和模型组大鼠进食情况正常,模型组较为活跃。第5周后模型组进食量及体重增加较快,活动情况不及正常组,毛色偏暗。第8周末后模型组体重增长放缓,毛色暗,行动较为迟缓,用药组毛色趋于正常。大鼠体重持续增高,6周末模型组大鼠体重高于正常组(P0.05)。6周末模型组大鼠肝湿重高于正常组(P0.05)。模型组大鼠的肝体比随时间的推移而递增。6、8周末模型组大鼠肝指数较正常组高,差异有统计学意义(P0.05) 2.形态学改变：模型组大鼠4周末少量肝细胞出现体积增大和脂肪变性,6周末一定量肝细胞出现脂肪变性,8周末大量肝细胞脂肪变性,体积增大,肝细胞胞浆内可见大小不等的脂肪空泡,严重者空泡融合将细胞核挤向胞膜下。出现典型性的脂肪性变,早期脂肪肝模型复制成功。10周、12周上述病理特征更加明显,尤其第12周末模型组大鼠肝细胞明显肿大,呈黄色,中央静脉周围脂肪病变明显,胞浆疏松呈网状、半透明(胞浆疏松化),严重者胞浆几乎完全透明(气球样变)。用药组10、12周末有一定量的肝细胞有脂肪空泡,与模型组相比明显有所减轻。 3.生化指标：大鼠肝脂含量4、6、8、10、12周末模型组较正常组高(P0.05)；10、12周末用药组较模型组低(P0.05)。模型组大鼠血脂随造模时间逐渐升高。大鼠血脂6、8、10、12周末模型组较正常组高,差异有统计学意义(P0.05)。10周末用药组较模型组低,差异有统计学意义(P0.05)；12周末用药组较模型组低,差异有统计学意义(P0.05)。 模型组大鼠血清谷丙转氨酶随造模时间逐渐升高。6周末、8周末、10周末、12周末模型组较正常组高,差异有统计学意义(P0.05)。10周末膈下逐瘀汤组较模型组低,差异有统计学意义(P0.05),12周末用药组较模型组低,差异有统计学意义(P0.05)。 模型组大鼠血小板聚集率随造模时间递增。10周末、12周末模型组较正常组高,差异有统计学意义(P0.05)。10周末、12周末用药汤组较模型组低,差异有统计学意义(P0.05)。 大鼠血浆CD62p4周末、6周末、10周末、12周末模型组较正常组高,差异有统计学意义(P0.05);8周末模型组较正常组高,差异有统计学意义(P0.01)；10周末、12周末膈下逐瘀汤组比模型组低,差异有统计学意义(P0.01)。 [结论] 1.高脂饲料诱导的早期脂肪肝模型大鼠在8周末出现典型性的脂肪肝病理变化。 2.早期脂肪肝模型大鼠血浆CD62p的表达随肝脏脂肪变性的加重而递增,表明早期脂肪肝和血小板活化有关。 3.早期脂肪肝模型大鼠血小板聚集率随肝脏脂肪变性的加重而升高,表明早期脂肪肝可能存在血瘀证。膈下逐瘀汤介入后血小板聚集率的含量明显减少,佐证了早期脂肪肝可能存在血瘀证的假设。 4.早期脂肪肝模型大鼠用膈下逐瘀汤灌胃后,血脂、肝脂、血小板聚集率、谷丙转氨酶明显降低,血浆CD62p的表达也受到抑制,表明活血化瘀的方药对治疗早期脂肪肝有很好的疗效。临床上可应用活血化瘀法介入早期脂肪肝的治疗当中。
【关键词】：高脂饲料 早期脂肪肝大鼠 血小板活化 CD62p 血瘀证
【学位授予单位】：云南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R259;R-332
【目录】：

• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 英文缩写及中文对照表12-13
• 前言13-15
• 第一部分 文献整理、研究及综述15-25
• 1. 非酒精性脂肪肝的发病机制研究进展15-18
• 1.1 脂代谢紊乱15-16
• 1.2 胰岛素抵抗16
• 1.3 氧应激与脂质过氧化16-17
• 1.4 细胞因子17
• 1.5 气体分子17-18
• 2. 中医对脂肪肝的研究进展18-20
• 3. 脂肪肝和血小板活化之间的相关性20-21
• 4. 中医血瘀证与血小板活化之间的相关性21-25
• 第二部分 实验研究25-48
• 1. 实验材料25-26
• 1.1 实验动物25
• 1.2 实验试剂25-26
• 1.3 实验仪器26
• 2. 实验方法26-29
• 2.1 饲料及配方26-27
• 2.2 实验分组与造模27
• 2.3 实验给药及剂量27
• 2.4 标本的采取27-28
• 2.5 实验指标检测内容及方法28-29
• 2.6 统计学处理29
• 3. 实验结果29-48
• 3.1 一般情况观察29
• 3.2 高脂饲料致早期脂肪肝模型大鼠体重、肝重及肝体比的动态变化及膈下逐瘀汤对其的影响29-34
• 3.3 高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)的动态变化及膈下逐瘀汤对其的影响34-35
• 3.4 高脂饲料致脂肪肝模型大鼠肝脂(TC.TG)的动态变化及膈下逐瘀汤对其的影响35-38
• 3.5 高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血脂(TC.TG)的动态变化及膈下逐瘀汤对其的影响38-41
• 3.6 高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血浆CD62p的动态变化及膈下逐瘀汤对其的影响41-43
• 3.7 高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血小板聚集率的动态变化及膈下逐瘀汤对其的影响43-44
• 3.8 高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血浆CD62p与肝脏之间的相关关系44
• 3.9 高脂饲料致脂肪肝模型大鼠肝组织形态的动态变化44-48
• 第三部分 讨论48-54
• 1. 非酒精性脂肪肝大鼠模型的选择与复制48-49
• 2. CD62p在大鼠早期脂肪肝发病过程中的动态变化探析49-50
• 3. 活血化瘀经典方膈下逐瘀汤对早期脂肪肝大鼠各项指标的影响50-51
• 4. 高脂饲料致脂肪肝大鼠模型CD62p与血小板聚集率的关系分析51
• 5. 脂肪肝与中医血瘀证之间的关系探讨51-52
• 6. 存在问题及展望52-54
• 第四部分 结论54-55
• 参考文献55-59
• 参与科研项目及获奖情况59-60
• 致谢60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：493945