干细胞相关因子在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达

发布时间：2017-06-28 17:14

  本文关键词：干细胞相关因子在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景:现有研究表明,人与大鼠卵巢优势卵泡中的颗粒细胞具有表达干细胞特性的现象。目的:探讨干细胞相关因子在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达。方法:将大鼠卵巢组织制作石蜡切片后,使用免疫组化法检测CD34,CD133,ABCG2/Bcrp1,Pou5f1/Oct-4的表达。卵泡穿刺法获取颗粒细胞,并使用免疫组化法检测FSHR受体的表达以鉴定颗粒细胞的纯度。免疫组化法检测颗粒细胞CD44,C-Kit的表达情况,RT-PCR检测卵巢组织与颗粒细胞ABCG2/Bcrp1、Pou5f1/Oct-4、Nanog基因的表达情况。结果与结论:免疫组化法石蜡切片显示部分卵巢颗粒细胞CD34,CD133,ABCG2/Bcrp1,Pou5f1/Oct-4阳性表达,而Pou5f1/Oct-4蛋白的表达在卵泡发育的周期中逐步增多,并在黄体化的时候显著增强,形成白体后则消失,因而具有周期性表达的特点。卵泡穿刺法提取的原代颗粒细胞FSHR受体鉴定阳性率在95%以上。体外培养的颗粒细胞以长梭形或菱形为主,部分细胞有聚集生长现象,且CD44,C-Kit阳性表达。RT-PCR检测结果显示,卵巢组织与体外培养的颗粒细胞均不表达Nanog,卵巢低表达Pou5f1/Oct-4,强烈表达ABCG2/Bcrp1,颗粒细胞微弱表达Pou5f1/Oct-4,而ABCG2/Bcrp1表达较强。以上结果显示大鼠卵巢中的部分颗粒细胞具有干细胞的特性。
【作者单位】： 湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室;
【关键词】： 干细胞 卵巢 粒层细胞 培养 卵巢颗粒细胞 干细胞样细胞 干细胞特性 集落现象 阳性标志物 体外培养 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81303123) 中国博士后基金项目(2013T60770,2012M511382) 高等学校博士学科点专项科研基金项目(20114323120007) 湖南省重点实验室开放基金(2014XNFZ06)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction干细胞是一类具有自我更新和增殖分化能力,并具备再生为各种组织器官潜能的多向分化细胞[1],这也就意味着,无论人体内出现了何种的病理变化,干细胞移植都有希望作为一种治疗手段运用到未来的临床实际当中。目前的研究表明,卵巢中的干细胞可能包括卵巢上皮干

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 陈志钊;蔡凯晋;;血清干细胞因子(SCF)及其受体c-kit的研究进展[J];中外医疗;2013年13期

2 高芸;商雪莹;吕男男;滕卫平;单忠艳;;FAT10过表达促进人乳头状甲状腺癌细胞抗凋亡及集落形成能力的研究[J];实用预防医学;2013年06期

3 龙海红;;卵巢相关干细胞研究进展[J];现代生物医学进展;2012年31期

4 王妍;赵晓娥;杨培先;张仕强;苏利红;马保华;;小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2007年08期

5 曹青;王飞;林继先;陈书艳;;骨髓间充质干细胞对CD117~+心脏干细胞分化过程中转化生长因子βⅢ型受体表达的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年36期

6 陈毅斐;许程洁;王鑫泉;徐营;;小鼠卵巢颗粒细胞适宜培养体系及激素干预的影响[J];中国组织工程研究;2012年02期

7 何志旭;林槟;黄绍良;米蔷;黄景;;体外分化胚胎干细胞为造血干细胞重建造血功能的研究[J];中国病理生理杂志;2008年08期

8 乔威;冉峰;刘长建;;人外周血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定[J];中国组织工程研究;2013年36期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王宝平;马向东;马佳佳;陈必良;;MXC对小鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响[J];第四军医大学学报;2008年07期

2 杨永梅;陈娟;陈洋;姜怀志;;小鼠卵巢颗粒细胞的优化培养[J];中国畜牧兽医;2011年02期

3 吕麟华;石生益;廖天录;聂亚华;;卵母细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞、子宫内膜细胞、滋养层细胞体外培养液成分比较　　　　[J];甘肃畜牧兽医;2010年04期

4 王建起;Selvaraj J.NIMAL;曹文广;;Bmp8a和Bmp8b基因在体外培养小鼠卵巢颗粒细胞中的表达[J];中国农业大学学报;2013年03期

5 姜燕妮;张赛春;安婧;李霞;周海滨;刘宏珍;;多囊卵巢综合征患者强化运动指导的效果评价[J];检验医学与临床;2014年11期

6 李翠;刘亚伟;肖霄;刘爱华;罗海华;姜勇;;FAT10双甘酸突变体对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响[J];解放军医学杂志;2014年12期

7 张海侠;田玲;刘新峰;;内皮祖细胞移植治疗脑梗死的研究进展[J];中国脑血管病杂志;2015年03期

8 杨正望;刘慧萍;陈明辉;王小玉;严青;;补肾活血方对离体培养卵巢颗粒细胞性激素分泌的影响[J];湖南中医杂志;2015年04期

9 孙晋艳;黄洋;张航;吕丽华;;FSH对体外培养猪卵巢颗粒细胞生长及增殖的影响[J];山西农业科学;2011年05期

10 黄洋;孙晋艳;李鹏飞;靳辉;吕丽华;;绵羊卵泡颗粒细胞体外培养条件的优化[J];山西农业科学;2012年02期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 任锦锦;朱玲;;卵巢储备功能与生殖干细胞[A];全国中西医结合卵巢功能调控专题学术会议论文及摘要集[C];2014年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 蔡敏;干细胞调节心肌细胞代谢的分子显像研究[D];北京协和医学院;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 景毅;条斑星鲽（Verasper moseri）卵巢细胞系的建立及几种内分泌干扰物对其生殖与遗传毒性作用的研究[D];中国海洋大学;2010年

2 朱翠娟;醋酸铅对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡及凋亡基因表达影响的研究[D];河南农业大学;2009年

3 朱娜;小鼠发情周期卵泡发育、生长因子与促进腺激素受体表达规律及超数排卵研究[D];西北农林科技大学;2012年

4 刘然;新生鼠卵巢中卵泡膜干细胞的分离培养及鉴定[D];安徽医科大学;2012年

5 白龙;奶山羊卵巢特异性启动子的克隆及其转录活性的研究[D];西北农林科技大学;2013年

6 菅瑞珍;Ghrelin在绵羊颗粒细胞拟黄体化过程中的作用[D];内蒙古农业大学;2013年

7 匡野;通过优化Kex2 P1’位点在毕赤酵母中高效表达重组蛋白SCF[D];吉林大学;2014年

8 侯晓峰;神经生长因子对小鼠卵巢颗粒细胞增殖及孕酮分泌的影响[D];吉林大学;2014年

9 刘晓鹏;猪卵巢颗粒细胞的多能特性研究[D];西北农林科技大学;2014年

10 杜彦博;雌激素及其相关炎症因子对卵泡发育的影响[D];复旦大学;2012年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 高庆华,蒋超祥,韩春梅;FSH和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响[J];中国草食动物;2004年04期

2 杨永梅;陈娟;陈洋;姜怀志;;小鼠卵巢颗粒细胞的优化培养[J];中国畜牧兽医;2011年02期

3 刘冉;兰玲;于静;;内皮祖细胞研究进展[J];中华实用诊断与治疗杂志;2011年07期

4 冯雨峰;闫雷;;不同剂量PMSG/HCG对小鼠超数排卵的效果[J];家畜生态学报;2008年04期

5 李芳,郑月慧,郑莉萍;生长因子对卵泡发育调节作用的研究进展[J];江西医学院学报;2005年05期

6 周秀娟;闫醒军;何延政;刘勇;施森;江隽;;人外周血、脐血、脂肪组织来源的内皮祖细胞部分生物学特性比较[J];中国动脉硬化杂志;2011年08期

7 周其锋,何志旭,冯炼强,黄绍良,李树浓;用胚胎干细胞诱导的造血干/祖细胞重建小鼠造血功能研究[J];热带医学杂志;2003年01期

8 张静;郑月慧;郑丽萍;;排卵前期卵泡颗粒细胞端粒酶的表达及其影响因素[J];生理学报;2005年06期

9 冯蕾;吴发伟;张振强;韩骅;;PMSG与hCG给予剂量及时间对小鼠超排卵效果的影响[J];现代肿瘤医学;2010年12期

10 张玉敏;马明月;段志文;裴秀丛;苏芯;;卵巢颗粒细胞体外培养体系的建立及DEHP、MEHP对其增殖功能的影响[J];沈阳医学院学报;2008年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 宿滨，王启发，姜良，，马青年，姚兰春;干扰素－α对兔离体的卵巢颗粒细胞孕酮生成的影响[J];基础医学与临床;1994年03期

2 姚晶萍;邱学敏;高磊;吴效科;侯丽辉;倪延群;;小檗碱和葛根素对卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗的调控[J];科技导报;2008年09期

3 许振成;许虹;张素坤;邢福祺;;2,3,7,8-四氯二苯并对二VA英对大鼠卵巢颗粒细胞雌二醇和孕酮分泌的影响[J];生态毒理学报;2009年01期

4 赵明,方芳,王会信,周廷冲;EGF对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分化影响的研究[J];生理学报;1993年03期

5 蔡泽骏;性激素对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡基因表达的作用[J];海峡药学;2002年06期

6 祁冰;侯丽辉;吴效科;杨琳;宋家欣;;基因芯片研究小檗碱对胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞基因表达的影响[J];科技导报;2008年23期

7 张仕明;许河生;;大鼠卵巢颗粒细胞纤溶酶原激活因子的测定[J];细胞生物学杂志;1985年04期

8 赵海波,罗丽兰,刘义;胰岛素样生长因子-Ⅰ在体外对人卵巢颗粒细胞雌二醇和孕酮产生量及超微结构的影响[J];中华妇产科杂志;1998年09期

9 赵海波,罗丽兰,刘义;胰岛素样生长因子-I对人卵巢颗粒细胞DNA合成的影响[J];第四军医大学学报;2000年03期

10 张玮,倪江,程龙庆,张辉,王京花,张丽敏;抑制和兴奋性氨基酸对兔卵巢颗粒细胞雌孕激素生成的影响[J];基础医学与临床;1999年06期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 朱翠娟;袁慧;朱家增;李小波;贺秀媛;张君涛;仝宗喜;王国瑾;刘宗平;;醋酸铅对小鼠卵巢组织结构和卵巢颗粒细胞凋亡的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会2009年学术研讨会论文集[C];2009年

2 黄丽丽;;低剂量米非司酮对人卵巢颗粒细胞的影响[A];中华医学会第一届全球华人妇产科学术大会暨第三次全国妇产科中青年医师学术会议论文汇编[C];2007年

3 何泓;王少晶;翁慧男;李翠兰;谭鹰;李维枢;苏静;陈见美;生秀杰;;卵巢颗粒细胞HOXA10基因的表达受睾酮调控[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科内分泌会场（妇科内分泌学组、绝经学组、计划生育学组）论文汇编[C];2012年

4 罗新;陈舒;陈芳;王晓玉;蒋学风;帅翰林;;脐带间充质干细胞修复化疗所致卵巢颗粒细胞损伤的体外实验研究[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科肿瘤会场（妇科肿瘤学组、妇科病理学组）论文汇编[C];2012年

5 杨宏敏;宋翠淼;杜惠兰;;逍遥丸含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞内分泌功能及FSHR表达的影响[A];中国中西医结合学会生殖医学分会首届学术年会暨生殖医学专业委员会成立大会论文汇编[C];2014年

6 倪江;朱辉;;大鼠多囊卵巢颗粒细胞凋亡的实验研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展（下册）[C];1999年

7 何晓红;杨利国;曹少先;;质粒pEGS/2SS转染对猪和牛卵巢颗粒细胞增殖和激素分泌的影响[A];第十次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2006年

8 邵康;吴小雪;盛晟;张佳;李维新;周杰;;组脂联素对皖南花猪卵巢颗粒细胞性激素生成的影响[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年

9 肖蕴祺;倪迎冬;;Kisspeptin-10对鸡卵巢颗粒细胞孕酮分泌的影响及机制研究[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年

10 郝红娟;王惠兰;张琰;张艳彬;;顺铂、VP-16、长春新碱、博来霉素对人卵巢颗粒细胞影响的比较[A];中华医学会第三次全国绝经学术会议暨绝经相关问题学习班论文汇编[C];2011年

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 程静;微囊化卵巢颗粒细胞长期体外培养及同种异体体内移植的研究[D];浙江大学;2010年

2 邬静;大鼠卵巢颗粒细胞体外生殖毒性评价替代模型的建立与应用[D];湖南农业大学;2011年

3 孙美艳;钙激活氯离子通道ANO1在卵巢颗粒细胞中的表达与功能[D];吉林大学;2014年

4 夏天;补肾调冲方对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分泌及其相关基因表达的影响[D];天津中医学院;2005年

5 李沛霖;补肾调冲含药血清对离体大鼠卵巢颗粒细胞分泌功能与结构的影响[D];天津中医学院;2005年

6 魏兆莲;二甲双胍对PCOS患者卵巢颗粒细胞胰岛素受体底物-1及P450芳香化酶的作用[D];安徽医科大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张静;端粒酶在卵巢颗粒细胞中的表达及其调控机理的研究[D];江西医学院;2004年

2 凌志杰;骨髓间充质干细胞对卵巢颗粒细胞凋亡的作用研究[D];福建医科大学;2011年

3 尹巧芝;资冲颗粒对卵巢颗粒细胞产生雌激素影响的研究[D];成都中医药大学;2003年

4 杨涛;微囊藻毒素LR致大鼠卵巢颗粒细胞氧化损伤及机制探讨[D];福建医科大学;2011年

5 卫红霞;吗啡对体外培养的人卵巢颗粒细胞MORmRNA表达的影响[D];山西医科大学;2007年

6 李肖梅;以肝脾为核心干预高催乳素血症模型动物离体卵巢颗粒细胞凋亡机制探索[D];贵阳中医学院;2014年

7 陈芳;脐带间充质干细胞修复化疗所致卵巢颗粒细胞损伤的体外实验[D];暨南大学;2010年

8 刘红羽;Kisspeptin对牛卵巢颗粒细胞孕酮分泌影响的研究[D];吉林农业大学;2014年

9 赵煜;玉米赤霉烯酮诱导卵巢颗粒细胞凋亡信号通路研究[D];西北农林科技大学;2014年

10 侯晓峰;神经生长因子对小鼠卵巢颗粒细胞增殖及孕酮分泌的影响[D];吉林大学;2014年

  本文关键词：干细胞相关因子在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达，由笔耕文化传播整理发布。

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