大鼠原代小胶质细胞的分离和培养方法的改进

发布时间：2017-06-29 15:04

  本文关键词：大鼠原代小胶质细胞的分离和培养方法的改进，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探索改进大鼠原代小胶质细胞培养分离纯化方法,以获取数量多、功能活性稳定的小胶质细胞。方法:在Miriam Mecha的混合胶质细胞培养方法的基础上稍加改良,采用直立手摇法进行分离纯化小胶质细胞,细胞铺板后再采用差速贴壁法进一步得到更纯的小胶质细胞。使用台盼蓝法进行细胞计数;采用CD11b免疫荧光方法对纯化的小胶质细胞进行纯度鉴定;采用原代小胶质细胞吞碳粒实验对其功能活性进行检测。结果:改进的方法可以稳定地获取大约1×106个/培养瓶(75 cm2,10 ml)的小胶质细胞,纯度达到98%,并且其吞噬活性也非常强。结论:改进的原代小胶质细胞培养方法操作时间短,获得细胞数量多、稳定性好、纯度高、功能活性强,且可第二次收获细胞,对于离体条件下进行小胶质细胞的研究具有广泛的实用价值。
【作者单位】： 上海中医药大学生理学教研室;
【关键词】： 小胶质细胞 培养方法 分离纯化 鉴定 大鼠
【基金】：国家自然科学基金(81274119) 上海市教育委员会科研创新项目(13YZ050) 上海市教育委员会重点学科资助项目(J50301)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 近年大量研究表明小胶质细胞在中枢神经系统的损伤和疾病中(如阿尔茨海默症,帕金森病等)起着非常重要的作用[1-3]。小胶质细胞(microglia)作为脑内固有免疫细胞,是中枢神经系统中最主要的一道免疫防线。一旦脑内出现损伤、感染、神经变性等过程均可刺激小胶质细胞由静息态转化

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 王宝萍;李东风;徐书雯;;原代小胶质细胞及神经元细胞培养不同纯化方法的比较[J];广东医学;2012年06期

2 赵虎;朱长庚;魏瑛;王伟;;小胶质细胞纯化分离培养方法的改良[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2007年01期

3 聂菁;李耀斌;周明;吕诚;;一种改良小胶质细胞的培养方法[J];江西医学院学报;2009年04期

4 刘飞;吴中平;;改进的大鼠原代Kupffer细胞分离与鉴定方法[J];临床与实验病理学杂志;2012年04期

5 刘洪翠;郑敏化;张丙芳;都艳玲;王晓明;韩骅;;小胶质细胞的培养及鉴定[J];现代生物医学进展;2011年10期

6 徐颖;张利青;夏趁意;董献文;赵妍;王星禹;;桂枝加葛根汤对神经炎症小鼠海马空间记忆、细胞因子和小胶质细胞的影响[J];中国实验方剂学杂志;2013年14期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王宝萍;李东风;徐书雯;;原代小胶质细胞及神经元细胞培养不同纯化方法的比较[J];广东医学;2012年06期

2 郑翔;马玉琼;周雪;彭谨;章为;;显示小胶质细胞的三种组织化学方法之比较[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2009年05期

3 黄欢;武汪洋;吴阳洋;陈寒青;尹艳艳;;LPS诱导小胶质细胞活化模型的建立及评价[J];安徽医药;2013年01期

4 吕超男;刘斌;马原源;苗玉超;刘颖;张晋霞;毛文静;孙静;成晓华;;咪多吡对帕金森病模型大鼠黑质纹状体胶质细胞增生及活化的影响[J];吉林大学学报(医学版);2014年05期

5 聂菁;李耀斌;周明;吕诚;;一种改良小胶质细胞的培养方法[J];江西医学院学报;2009年04期

6 耿慧;钟远;;8-9个月SD大鼠小胶质细胞的纯化分离培养[J];脑与神经疾病杂志;2010年02期

7 任怡;叶民;;胶质细胞与帕金森病免疫/炎症机制的关系[J];临床神经病学杂志;2014年01期

8 阮萍;杨春;欧超;骆成漂;秦虹;孙雯;李瑗;;树，

本文编号：498278