沙眼衣原体呼吸道感染诱导中性粒细胞浸润机制的研究

发布时间：2017-07-06 02:07

  本文关键词：沙眼衣原体呼吸道感染诱导中性粒细胞浸润机制的研究

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【摘要】：目的： 用沙眼衣原体小鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum,Cm)呼吸道吸入感染小鼠诱导小鼠衣原体肺炎。在感染后的不同时期,检测中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils, PMN)的免疫应答水平、PMN聚集与细胞因子IL-17分泌的相关性,以及与PMN聚集相关的细胞因子、趋化因子、粘附分子及Toll样受体的表达水平,探讨在小鼠Cm呼吸道感染中PMN浸润机制。 方法： C57BL/6(C57)小鼠经鼻腔吸入3×103IFU Cm,建立小鼠沙眼衣原体肺炎模型。取感染不同时间点小鼠肺组织进行组织病理学染色、分离肺组织单个核细胞进行PMN计数以及肺组织髓过氧化物酶(myelo-peroxidase, MPO)检测,确定感染小鼠肺组织有中性粒细胞聚集；用流式细胞术检测聚集的PMN活性变化。应用RT-PCR技术检测Cm感染诱导肺组织IL-17mRNA的表达,利用ELISA技术检测肺组织单个细胞培养上清IL-17的分泌,应用抗鼠IL-17单克隆抗体中和Cm感染小鼠内源性IL-17,计数其支气管肺泡灌洗液中的PMN数量,分析确定在小鼠Cm呼吸道感染过程中PMN浸润与有IL-17产生的相关性；利用RT-PCR技术,检测Cm感染小鼠肺组织与PMN浸润相关的活性分子mRNA的表达水平,包括：粘附分子ICAM-1、选择素E-selectin、P-selectin、L-selectin, Toll样受体TLR2、TLR4及MyD88,前炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α及趋化因子MIP-2、LIX、KC、MCP-1。 结果： Cm呼吸道感染诱导C57小鼠衣原体肺炎,小鼠体重下降,肺组织大量衣原体生长(IFU增高)。与未感染对照组(第0天)比较,Cm感染诱导大量PMN在肺组织募集,PMN数量、百分率及活性明显增高,髓过氧化物酶MPO的含量也显著增高,炎症并于感染后第7天达到最高峰。Cm呼吸道感染诱导IL-17在肺组织的表达及分泌。与给予抗鼠IL-17同型抗体IgG2a的对照组比较,IL-17中和小鼠肺组织PMN的浸润水平显著降低,肺泡支气管灌洗液PMN的数量减少,相关性分析结果显示Cm呼吸道感染中肺组织IL-17的分泌水平与PMN的浸润呈正相关。同时,Cm呼吸道感染的C57小鼠,肺组织中与PMN浸润相关的活性分子：粘附分子ICAM-1、选择素E-selectin、P-selectin、L-selectin,Toll样受体TLR2、TLR4及MyD88,前炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α及趋化因子MIP-2、LIX、KC、MCP-1的表达水平也显著。 结论： 一定剂量的沙眼衣原体呼吸道感染诱导小鼠衣原体肺炎,小鼠肺组织大量PMN浸润,活性增高,PMN的聚集与感染后大量产生的IL-17呈正性相关,感染后高表达的前炎性细胞因子、PMN趋化性细胞因子、粘附分子、选择素、Toll样受体等在PMN趋化及浸润中发挥重要作用。
【关键词】：沙眼衣原体 中性粒细胞 粘附分子 Toll样受体 趋化因子选择素 前炎性细胞因子 IL-17
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R392
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 符号说明10-12
• 前言12-16
• 研究现状、成果12-15
• 研究目的、方法15-16
• 一、中性粒细胞在小鼠衣原体呼吸道感染中的应答水平及与IL-17的关系16-39
• 1.1 对象和方法16-24
• 1.1.1 实验材料16-19
• 1.1.2 实验方法19-24
• 1.2 结果24-35
• 1.2.1 小鼠衣原体呼吸道感染模型的建立24-26
• 1.2.2 Cm呼吸道感染小鼠肺组织中性粒细胞应答水平26-30
• 1.2.3 Cm呼吸道感染小鼠肺组织IL-17的产生30-31
• 1.2.4 Cm呼吸道感染小鼠肺组织PMN的浸润水平与IL-17分泌的相关性31-35
• 1.3 讨论35-38
• 1.4 小结38-39
• 二、Cm呼吸道感染中与中性粒细胞聚集相关的活性分子表达39-55
• 2.1 对象和方法39-45
• 2.1.1 实验材料39
• 2.1.2 实验方法39-45
• 2.2 结果45-50
• 2.2.1 Cm呼吸道感染诱导前炎症细胞因子在肺组织中的表达45-46
• 2.2.2 Cm呼吸道感染诱导小鼠肺组织中性粒细胞趋化因子的表达46-47
• 2.2.3 Cm呼吸道感染诱导小鼠肺组织粘附分子与选择素的表达47-48
• 2.2.4 Cm呼吸道感染诱导小鼠肺组织Toll样受体的表达48-50
• 2.3 讨论50-54
• 2.4 小结54-55
• 结论55-56
• 参考文献56-62
• 发表论文和参加科研情况说明62-63
• 综述63-74
• 参考文献68-74
• 致谢74

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：524358