氢氧化铝吸附重组肺炎蛋白疫苗解吸附方法

发布时间：2017-07-06 05:49

  本文关键词：氢氧化铝吸附重组肺炎蛋白疫苗解吸附方法

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【摘要】：目的:建立氢氧化铝吸附重组肺炎蛋白疫苗原液及制剂的解吸附方法。方法:在各重组肺炎蛋白的氢氧化铝吸附原液或4组分疫苗制剂半成品中加入解吸附试剂[含0.4%(m/v)十二烷基二甲基甜菜碱(BS-12),0.25 mo L·L-1的磷酸盐缓冲液,p H 6.5],37℃下静置4.5 h,通过Lowry蛋白检测、SDS-PAGE和HPLC对蛋白的解吸附率进行测定。结果:结果显示该方法可将重组肺炎蛋白疫苗的4种蛋白从氢氧化铝佐剂上解吸附下来,解吸附率达95%以上,且不影响蛋白的完整结构。结论:建立了重组肺炎蛋白疫苗4个组分蛋白的氢氧化铝吸附原液及制剂半成品的解吸附方法,可用于疫苗吸附原液和制剂半成品定量分析的前处理。
【作者单位】： 天津科技大学生物工程学院;天津康希诺生物技术有限公司;
【关键词】： 重组肺炎蛋白疫苗 氢氧化铝 解吸附 Lowry法 蛋白凝胶电泳 高效液相色谱
【基金】：国家“重大新药创制”科技重大专项(2014ZX09102046)
【分类号】：R392
【正文快照】： 4组分重组肺炎蛋白疫苗(PBPV)主要成分为3种不同菌株来源的肺炎球菌表面蛋白A(即Psp A-5668,Psp A-3296和Psp A-RX-1 3种蛋白)[1]和肺炎链球菌溶菌素突变体(Ply LD),所用佐剂为氢氧化铝(AH)。蛋白与佐剂之间的静电引力、基团交换、范德华力等作用较强,结合紧密。实际研究中,需

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本文编号：524902