Miox基因在胚胎前肾发育过程中的时空表达及其功能的初步研究

发布时间：2017-07-07 03:02

  本文关键词：Miox基因在胚胎前肾发育过程中的时空表达及其功能的初步研究

  更多相关文章： Miox 前肾 爪蟾 斑马鱼 肾脏发育

【摘要】：目的：研究Miox基因在胚胎前肾发育过程中的表达模式及其对胚胎前肾发育的调控作用的初步研究。 方法：生物信息学分析Miox蛋白在不同物种之间的同源性及保守性；通过半定量(RT-PCR)PCR及实时荧光定量(Real-Time PCR)PCR以及整胚原位杂交(whole-mount in situ hybridization,WISH)技术检测Miox基因在爪蟾和斑马鱼胚胎前肾发育过程中的时空表达模式；通过显微注射技术将Miox mRNA注射到斑马鱼胚胎单细胞期，观察Miox因过表达后对斑马鱼胚胎前肾发育的调控。 结果：从生物信息学分析可知，Miox基因在物种进化上是高度保守的；Miox蛋白在不同物种间的同源性高达65%-70%。我们在爪蟾及斑马鱼胚胎上都做了Miox基因的表达谱分析。Miox基因在爪蟾胚胎第28期开始有微量表达，随着胚胎的发育表达量逐渐增高，在胚胎第40期表达含量达到最高并且以稳定的水平在后面时期表达。整胚原位杂交呈现出相似的表达趋势。我们还发现，在爪蟾整个胚胎发育过程中，miox都只在前肾表达。换句话说，miox是一个肾脏特异性表达基因。斑马鱼real-time PCR显示Miox基因在胚胎发育Sphere时期有少量表达，随后表达下降，在Shield,Bud,5-6somites,24hpf几个时期几乎没有表达，在胚胎发育到36hpf表达又逐渐增多，直到48hpf时期表达达到顶峰，随后表达逐渐下降，在60hpf,72hpf甚至到成年期表达基本稳定维持在某一水平。此外，我们同时检测了Miox基因在斑马鱼72hpf的表达情况，其也只在前肾的位置表达。而且miox过表达以后发现有3个前肾的特异性标记基因(slc20a1a,foxj1a,pdzk1)的表达上调，上调比例分别为80%，，69%和91%。有一个基因(gata3)表达下调，下调比例是90%。 结论：Miox基因在物种之间是高度保守的，并且在胚胎发育过程中只在前肾表达，是一个肾脏特异性基因。Miox基因在前肾发育过程中起着重要的调控作用。Miox基因可能为我们的肾脏提供一个特异性的肾脏标记。
【关键词】：Miox 前肾 爪蟾 斑马鱼 肾脏发育
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R394
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-25
• 2 实验结果25-27
• 3 讨论27-30
• 全文总结30-31
• 参考文献31-34
• 附插图34-37
• 文献综述37-54
• 参考文献46-54
• 致谢54-55
• 攻读硕士期间发表的文章55-56

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本文编号：528607