家蝇伴侣蛋白CCTη基因序列分析与表达模式

发布时间：2017-07-07 16:22

  本文关键词：家蝇伴侣蛋白CCTη基因序列分析与表达模式

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【摘要】：目的对家蝇伴侣蛋白CCTη(MD-CCTη)基因进行序列分析,克隆其c DNA序列并检测家蝇CCTη基因的表达情况。方法采用表达序列标签(EST)测序技术从已构建的家蝇幼虫c DNA文库中筛选MD-CCTη基因,对其进行序列测定和分析;提取家蝇3日龄幼虫RNA,逆转录c DNA为模板,PCR扩增,并与p MD-19T载体连接,转化大肠杆菌DH5α中;采用实时荧光PCR技术分析MD-CCTη基因在家蝇不同生长发育阶段及3日龄幼虫组织中表达模式。结果 MD-CCTη基因开放阅读框(ORF)全长1 632 bp,编码543个氨基酸,理论分子量59.3 k Da,等电点6.27;该基因推导的氨基酸序列与其他昆虫同源序列比较有较高的相似性(93%),聚类分析结果显示,家蝇与地中海实蝇和果蝇的亲缘关系最近(100%);MD-CCTη在发育阶段以卵期表达量最高,其次为1日龄幼虫,雄性成虫表达量最低;MD-CCTη基因在家蝇3日龄幼虫组织中气管表达量最高,其次为唾液腺,在体壁中表达量最低。结论成功克隆出MD-CCTη基因的c DNA序列,MD-CCTη在家蝇不同发育阶段及组织中表达模式存在明显差异。
【作者单位】： 贵阳医学院寄生虫学教研室;
【关键词】： 家蝇 伴侣蛋白(CCT) 克隆 实时荧光 表达模式
【基金】：国家自然科学基金(81160204;81360254) 贵州省科技厅基金(黔科合【2010】3160) 高校博士点学科专项科研基金(20105215120001)
【分类号】：R384.2
【正文快照】： Molecular cloning,sequencing and expression pattern of chaperonin genein housefly-Musca domesitcaZHAO Xue-jun,GUO Guo,XIU Jiang-fan,et al(School of Basic Medical Sciences,G uiyang Medical College,G uiyang,热休克蛋白(heat shock protein,HSP)又称应激反应蛋

【参考文献】

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7 田

本文编号：530953