VCAM-1基因敲减对小鼠间充质干细胞免疫调节能力的影响

发布时间：2017-07-15 19:34

  本文关键词：VCAM-1基因敲减对小鼠间充质干细胞免疫调节能力的影响

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【摘要】：目的:利用siRNA技术建立稳定低表达血管间粘附分子1(VCAM-1)基因的小鼠间充质干细胞系(C3H10T1/2)并探讨其对小鼠间充质干细胞免疫调节能力的影响。方法:利用基因重组技术构建逆转录病毒质粒GV118-VCAM-1-RNAi,应用酶切及测序方法进行相关鉴定,转染包装细胞系T293,收集病毒上清并感染C3H10T1/2细胞(C3),应用荧光倒置显微镜及流式细胞术检测转染效率,淋巴母细胞转化实验(LTT)和混合淋巴细胞反应(MLR)检测其免疫调节能力。结果:酶切和测序鉴定表明,成功构建了低表达VCAM-1的重组逆转录病毒载体GV118-VCAM-1-RNAi,感染C3H10T1/2细胞后,应用荧光显微镜和流式细胞术分选获得稳定低表达VCAM-1的间充质干细胞GV118-VCAM-1/C3;LTT和M LR实验结果显示,低表达VCAM-1基因的M SC抑制T淋巴细胞增殖的能力显著下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:敲减VCAM-1可显著下调MSC抑制T淋巴细胞增殖的能力。这为进一步研究VCAM-1基因与MSC免疫抑制功能的相关性提供了可靠的实验基础。
【作者单位】： 天津医科大学总医院儿科;军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室;河北北方学院研究生部;
【关键词】： 血管细胞粘附分子 小RNA干扰 基因转染 间充质干细胞 免疫调节
【基金】：国家重点基础研究计划(973项目2010CB833600) 国家自然科学基金面上项目(31070996,31171084) 天津市自然科学基金项目(12JCYBJC17100)
【分类号】：R392
【正文快照】： △共同第一作者:倪永青,刘元林为共同第一作者.J Exp Hematol 2015;(3):796-801血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesionmolecule-1,VCAM-1),又称CD106,属于细胞粘附分子免疫球蛋白超家族(SIGF)成员,主要位于血管内皮细胞及各种白细胞的表面,是一类具有多种生物学活性的跨

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