改良的间充质干细胞的培养方法

发布时间：2017-07-18 19:30

  本文关键词：改良的间充质干细胞的培养方法

  更多相关文章： 人脐带间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 BALB/C小鼠 细胞培养 免疫表型 诱导分化

【摘要】：第一部分改良的人脐带间充质干细胞的培养方法 目的：建立人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的分离和培养方法。 方法：用酶消化法、传统组织块法和改良组织块法从人脐带华通胶中分离间充质干细胞，对比三种方法所培养的原代细胞生长状态及数量；流式细胞仪检测改良组织块法所培养细胞的免疫表型；用不同的培养体系诱导改良法所培养细胞向成骨细胞及成脂细胞分化，并对其进行鉴定。 结果：改良的hUCMSCs的培养方法所培养的细胞纯度更高，改良组织块法所获得的原代细胞数量是酶消化法的2倍左右，是传统组织块法的约20倍，细胞呈长梭形生长；高表达CD90、CD44，不表达CD45、CD34；茜素红染色及油红O染色证实了hUCMSCs可分化为脂肪细胞和成骨细胞。 结论：建立了hUCMSCs的培养新方法，证实了hUCMSCs的增殖能力和多向分化潜能，为其在疾病治疗方面的应用提供支持。 第二部分改良的BALB/C小鼠骨髓间充质干细胞的培养方法 目的：建立BALB/C小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的培养方法。 方法：用全骨髓培养法和改良的全骨髓培养法从BALB/C小鼠胫骨和股骨中分离间充质干细胞，对比两种方法所培养原代细胞的生长情况及数量；流式细胞仪检测改良法所培养细胞的免疫表型；用成骨诱导培养体系诱导改良法所培养的BMSCs向成骨细胞分化，并对其进行鉴定。 结果：改良的全骨髓培养法所培养的原代细胞数量上较传统方法增加了约50%，细胞生长更快；流式细胞学检测其高表达CD90和CD44，不表达CD45；茜素红染色证实了BMSCs可分化为成骨细胞。 结论：建立了BALB/C小鼠BMSCs培养的新方法，为其在基础研究中的应用提供支持。
【关键词】：人脐带间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 BALB/C小鼠 细胞培养 免疫表型 诱导分化
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 缩略语5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 第一部分 改良的人脐带间充质干细胞的培养方法12-24
• 一. 实验材料12-13
• 二. 实验方法13-17
• 三. 实验结果17-22
• 四. 讨论22-24
• 第二部分 改良的BALB/C小鼠骨髓间充质干细胞的培养方法24-33
• 一. 实验材料24
• 二. 实验方法24-26
• 三. 实验结果26-31
• 四. 讨论31-33
• 全文总结33-34
• 参考文献34-37
• 综述37-56
• 参考文献51-56
• 致谢56

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