驱动蛋白Kif18A多克隆抗体的制备、纯化及免疫特异性检测

发布时间：2017-07-20 15:12

  本文关键词：驱动蛋白Kif18A多克隆抗体的制备、纯化及免疫特异性检测

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【摘要】：采用标签蛋白诱导表达纯化、蛋白质谱、Western Blot、免疫荧光染色等多种分子生物学与细胞生物学方法,探究了一种制备蛋白特异性多克隆抗体、检测抗体并且运用抗体获得蛋白翻译后修饰信息的实验思路.结果表明,使用这种方法可以高效地得到Kif18A的兔源多克隆抗体.得到的抗体血清可以很好地应用于Western Blot(蛋白免疫印迹)、Co-IP(免疫共沉淀)等分子生物学实验.将抗体血清纯化后可以应用于免疫荧光染色实验,并可以获得良好清晰的实验结果.此外,利用制备出的Kif18A特异性抗体对细胞内源性Kif18A进行Co-IP实验后进行质谱分析,得到了内源性Kif18A蛋白翻译后的修饰信息,为研究Kif18A蛋白的定位与功能奠定了良好的基础.
【作者单位】： 天津师范大学生命科学学院;
【关键词】： 驱动蛋白KifA 多克隆抗体 蛋白质谱 蛋白磷酸化
【基金】：国家自然科学基金面上项目(31271485);国家自然科学基金青年基金资助项目(31301138) 2011年教育部“新世纪优秀人才支持计划”资助项目(NCET-11-1066) 天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目(12JC2DJC21400)
【分类号】：Q51;R392
【正文快照】： 在已知的40余种驱动蛋白(kinesin)分子中,Kif18A蛋白近年来受到了越来越多的关注.在先前的文献中报道,Kif18A蛋白分子在体外实验中证实具有微管解聚活性.这不同于早期报道中典型的驱动蛋白分子的特性.先前认为驱动蛋白家族分子中有些具有微管解聚酶功能(如Kif2C,即MCAK蛋白),

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3 岳e，

本文编号：568631