结核分枝杆菌毒素蛋白higB的原核表达及分析

发布时间：2017-07-28 20:27

  本文关键词：结核分枝杆菌毒素蛋白higB的原核表达及分析

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【摘要】：目的克隆编码结核分枝杆菌毒素基因higB并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增higB基因;构建重组表达质粒pET-32a(+)-higB;筛选出阳性重组质粒后转化大肠杆菌,诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果成功扩增出了higB基因,克隆于载体pET-32a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后higB蛋白没有发生表达。结论已成功构建结核分枝杆菌毒素基因higB的原核表达栽体,但大肠杆菌BL21不能表达出higB蛋白。
【作者单位】： 潍坊医学院临床检验诊断学教研室;潍坊医学院附属医院检验科;潍坊医学院病原生物学教研室;菏泽市第三人民医院检验科;中国人民解放军第401医院检验科;
【关键词】： 结核分枝杆菌 毒素抗毒素系统 higB 蛋白表达
【基金】：国家自然科学基金联合资助(课题编号:30972639,课题编号:81170080)
【分类号】：R378.911
【正文快照】： 毒素抗毒素系统(toxin-antitoxin system,TAS)最早 物科技有限公司。发现于大肠杆菌的质粒,随后的研究表明,细菌染色体 1.1.2主要试剂及仪器质粒抽提试剂盒、胶回收试上普遍存在着大量的TAS。大部分TAS由一对共表剂盒、PrimeSTAR HS DNA Polymerase、GC Buffer、达基因组成,编，

本文编号：585891