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包裹NO的脂质微气泡促进大鼠深静脉血栓溶解的实验研究

发布时间:2017-07-29 10:06

  本文关键词:包裹NO的脂质微气泡促进大鼠深静脉血栓溶解的实验研究


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【摘要】:目的:深静脉血栓形成(Deep vein thrombosis, DVT)是骨科大手术后常见的并发症,目前主要的治疗手段为药物溶栓。然而常见的溶栓药物如低分子肝素、利伐沙班等可能增加出血风险或者伤口并发症。NO具有扩张血管、抑制血小板聚集等抗血栓形成的特性。本课题旨在研究NO微气泡对大鼠DVT模型的溶栓效果、安全性以及作用机制。 方法:采用下腔静脉以及左髂总静脉结扎法建立大鼠深静脉血栓模型。实验分为三组:治疗组(NO微泡静脉注射,1.6ml/kg, bid);对照组(生理盐水静脉注射,剂量与治疗组相同):空白组(假手术组,不行其余任何处理)。分别于造模后第二天和第八天处死老鼠,下腔静脉血栓形成段将静脉壁与血栓分离,血栓称重后提取总蛋白用于western检测(血管细胞间粘附分子,VCAM-l)。下腔静脉壁液氮冻存用于RT-PCR定量检测(基质金属酶-2(MMP-2),基质金属酶-9(MMP-9),调节蛋白(TM),内皮一氧化氮合酶(eNOS))。左髂总静脉血栓形成处整体取下福尔马林固定用于HE染色及免疫组化染色分析。每只老鼠处死前抽取外周静脉血,用于凝血四项检查。 结果:第八天时,经NO微泡治疗后的大鼠深静脉血栓的重量(0.018±0.005gvs0.085±0.019g,P0.01)以及重量/长度(0.041±0.008g/cm vs0.07±0.005g/cm, P0.05)明显减少。而且凝血四项结果表明连续八天的NO注射未对凝血酶时间、凝血酶原时间以及活化部分凝血酶时间产生统计学差异的影响。HE染色结果显示注射NO微泡的大鼠血栓内部纤维化区域显著增大,血栓趋于成熟。免疫组化镜下观察和western定量也证明了血栓形成的促进因素VCAM-1的表达显著降低。通过基因定量分析我们发现,在早期创伤后愈合和基质翻转中起重要作用的MMP-2、MMP-9以及反映体内抗凝状态的TM的表达显著增高,由eNOS控制的NO的释放也明显增多。 结论:NO微泡可显著加强大鼠深静脉血栓的溶解,并且不会增加出血的风险。NO微泡的这种抗血栓形成的特性可能与纤维化系统、胶原翻转、内皮功能以及机体的抗凝状态相关。加之,用于包裹NO的微气泡可加强血栓在超声下的显影,以后将该NO微泡应用于超声造影剂,可能同时实现DVT的无创诊断与安全治疗。
【关键词】:深静脉血栓 血栓溶解 一氧化氮 微泡 凝血功能 大鼠模型
【学位授予单位】:南京大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R543.6;R-332
【目录】:
  • 英文缩略词表5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-11
  • 材料和方法11-12
  • 实验方法12-19
  • 统计方法19
  • 结果19-23
  • 讨论23-26
  • 结论26-27
  • 参考文献27-32
  • 综述32-42
  • 参考文献38-42
  • 硕士期间发表文章42-43
  • 硕士期间所获奖励43-44
  • 个人简介44-45
  • 致谢45-47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李栋,李艳,黄宪章,张平安,刘军,李庚山;雌激素受体基因多态性与高血压关系的研究[J];临床检验杂志;2002年02期

2 田智;郭小芳;周锋;黄春霞;粟敏;龙晓蕾;刘立鹏;;雌激素受体-α基因多态性与湖南女性原发性膝骨性关节炎的关系[J];实用预防医学;2009年06期



本文编号:588608

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