幽门螺杆菌侵入胃粘膜上皮细胞对细胞功能的影响及其机制

发布时间：2017-07-30 12:02

  本文关键词：幽门螺杆菌侵入胃粘膜上皮细胞对细胞功能的影响及其机制

  更多相关文章： 幽门螺杆菌 侵袭 增殖 凋亡 IL-8 AID NF-κB

【摘要】：目的：长期以来幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp)被认为是一种胞外菌，近年有研究发现，Hp可侵入胃上皮细胞，并可在细胞内繁殖存活，本课题旨在通过研究侵入胞内的Hp对胃上皮细胞功能的影响，探讨Hp侵入胞内的致病作用及其机制。 方法：从本实验室保存的Hp菌株中选择2株高侵袭力菌株（标准株NCTC11637及临床株T494）和2株低侵袭力菌株（标准株SS1及临床株T049），分别感染人胃腺癌上皮细胞（AGS细胞）(MOI=100)，以抗β1整合素抗体预处理阻止侵袭为对照组，经庆大霉素保护性侵袭实验，采用以下方法检测侵入胞内Hp对细胞功能的影响：①CCK8法检测细胞的增殖；②流式细胞仪检测细胞凋亡；③ELISA检测白细胞介素因子8（interleukin-8，IL-8）的表达；④细胞免疫荧光检测活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶（activation-induced cytidine deaminase,AID）蛋白的表达；⑤实时定量反转录聚合酶链式反应（Real Time-PCR）分析AID的转录水平；⑥萤火虫荧光素酶评价核转录因子NF-κB活性。用SN-50预处理AGS细胞以抑制NF-κB活性，重复上述①-⑤的检测实验。 结果：1、侵入胞内的Hp⑴促进AGS细胞的增殖，高侵株NCTC11637、T494作用的细胞增殖率（37.72%和36.51%）均高于低侵株SS1、T049（26.97%和26.17%），抗β1整合素抗体处理后各组AGS细胞的增殖率均降低（p0.05）；⑵不影响AGS细胞的凋亡，高侵株NCTC11637、T494凋亡率（2.79%和2.51%）和低侵株SS1、T049凋亡率（2.70%和2.44%）均与control组的2.62%相当；⑶诱导IL-8的表达，高侵株NCTC11637、T494诱导的IL-8浓度（9.94pg/ml和9.10pg/ml）均高于低侵株SS1、T049（6.31pg/ml和6.30pg/ml），抗β1整合素抗体处理后各组IL-8的浓度均下降（p0.05）；⑷刺激AGS细胞表达AID蛋白，AID蛋白定位于胞浆。高侵株NCTC11637、T494诱导的AID平均荧光强度值（14.48和13.48）均高于低侵株SS1、T049（11.07和9.96），高侵株NCTC11637、T494诱导的AID基因的mRNA相对表达量（1.57和1.55）均高于低侵株SS1、T049（1.35和1.23）；抗β1整合素抗体处理后各组AID蛋白和mRNA的表达均减少（p0.05）；⑸激活NF-κB通路，，高侵株NCTC11637、T494的相对荧光素酶活性值（1.57和1.55）均高于低侵株SS1、T049（1.35和1.23），抗β1整合素抗体处理后各组NF-κB的相对荧光素酶活性值均降低；⑹NF-κB抑制剂SN-50处理后各组AGS细胞增殖率降低， IL-8、AID蛋白和mRNA表达水平均降低。 结论：⑴侵入胞内的Hp可促进AGS细胞增殖但不影响细胞凋亡，可诱导IL-8和AID的异常表达；⑵侵入胞内的Hp可通过激活NF-κB通路参与致病过程；⑶高侵株对AGS细胞功能的影响较低侵株强，侵入胞内的Hp的致病作用可能与Hp的侵袭水平有关。
【关键词】：幽门螺杆菌 侵袭 增殖 凋亡 IL-8 AID NF-κB
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378
【目录】：

• 英文缩略语4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 引言9-11
• 材料与方法11-24
• 结果24-36
• 讨论36-39
• 结论39-40
• References40-42
• 综述42-46
• 参考文献44-46
• 致谢46

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘栋;翟笑枫;;幽门螺旋杆菌与肝癌相关性的研究进展[J];现代肿瘤医学;2011年05期

2 张杰;佘菲菲;;幽门螺杆菌侵袭研究进展[J];中外医学研究;2012年07期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 吴中平;唾液幽门螺杆菌抗原测试板的临床应用研究[D];浙江大学;2011年

本文编号：594077