家蝇溶菌酶MDLZM基因克

发布时间：2017-08-04 09:35

  本文关键词：家蝇溶菌酶MDLZM基因克隆、表达和序列分析

  更多相关文章： 家蝇 家蝇溶菌酶(MDLZM) 克隆 表达 序列分析

【摘要】：目的探讨家蝇溶菌酶(MDLZM)基因及编码的蛋白质结构和特征。方法利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白序列的分析工具,结合其他生物信息学分析软件包,从Gen Bank上家蝇基因组序列识别出编码MDLZM的基因,分析预测该蛋白质的结构功能;设计引物PCR扩增MDLZM基因,将其克隆到原核表达质粒PEASY-E1中,重组质粒在大肠杆菌中的表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。结果 MDLZM基因序列最大开放阅读框(ORF)为435 bp,编码145个氨基酸,理论分子量为15 958.4 Da,等电点为8.65;构建的重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定确为MDLZM基因;SDS-PAGE分析结果显示,重组质粒可在大肠杆菌Origmi B/DE3中表达,表达产物纯化后得到的融合蛋白相对分子质量约为15958.4 Da,诱导18 h蛋白表达量最高,SDS-PAGE鉴定得到的蛋白条带与目的蛋白大小相符。结论成功构建PEASY-E1-MDLZM重组原核表达质粒并表达出融合MDLZM蛋白。
【作者单位】： 贵阳医学院寄生虫学教研室;皖北矿务局煤电集团总医院普外科;贵州省疾病预防控制中心;
【关键词】： 家蝇 家蝇溶菌酶(MDLZM) 克隆 表达 序列分析
【基金】：国家自然科学基金(81360254) 国家科技支撑计划课题(2011BAC06B12)
【分类号】：R384.2
【正文快照】： 溶菌酶(lysozyme,LZM)在机体的先天免疫中发挥重要作用,具有破坏菌体胞壁,导致细菌死亡的作用。广泛分布于生物体的体液、组织液[1]。根据来源不同分为:T4噬菌体溶菌酶、植物溶菌酶、微生物溶菌酶和动物溶菌酶,动物溶菌酶细分为:C型(chicken-lysozyme type)、G型(goose-type)[

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 孙国庆;哈福;苗永旺;李大林;;动物溶菌酶基因的研究进展[J];中国牛业科学;2012年03期

2 谷跃峰;丛丽娜;骆宁;;海参溶菌酶基因克隆及在毕赤酵母中的表达与纯化[J];大连工业大学学报;2010年05期

3 王峗;龙高群;张春林;田茂;;美洲大蠊i型溶菌酶基因的克隆及其功能预测[J];动物医学进展;2012年09期

4 刘益丽;邓霄禹;江明锋;;溶菌酶抑菌活性及检测方法研究进展[J];中国畜牧兽医;2013年08期

5 王美娟;刘丹丹;乔丹;张红绪;孔祥会;;鱼类g型和c型溶菌酶及其在渔业生产上的应用[J];水产科学;2014年03期

6 David M.IRWIN;;Genomic organization and evolution of ruminant lysozyme c genes[J];动物学研究;2015年01期

7 蒋锦坤;王际英;张利民;柳旭东;冯德智;姜柯君;张德瑞;;壳聚糖对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)幼鱼生长性能、体组成及非特异性免疫的影响[J];海洋与湖沼;2012年04期

8 张鹏;江明锋;马晓瑞;方毅;王永;;藏山羊瓣胃溶菌酶基因TGOLyz的克隆及组织表达分析[J];华北农学报;2013年03期

9 乔龙学;杜耀华;陈锋;程智;李抄;顾彪;李辰宇;段浩;吴太虎;;一种通用型颤振珠磨式微生物快速裂解系统的设计与实现[J];军事医学;2013年08期

10 章琼;孙盛明;李冰;蒋高中;朱健;戈贤平;;团头鲂g型溶菌酶基因全长cDNA的克隆与表达分析[J];南方水产科学;2015年02期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 丁辉;λ噬菌体溶源/裂解转变的动力学研究和细胞壁裂解酶的信息学研究[D];内蒙古大学;2008年

2 刘洋;蝙蝠听觉和食性相关基因的分子进化研究[D];华东师范大学;2012年

3 崔志文;鼠李糖乳杆菌影响仔猪肠道屏障功能的研究[D];浙江大学;2013年

4 游雅楠;67kD层粘连蛋白受体及其调控通路在文蛤（Meretrix meretrix）细胞生长和幼虫发育中的功能解析[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2013年

5 许娜;青岛文昌鱼（Branchiostoma japonicum）ChTl和Lys基因的结构、表达和功能分析[D];中国海洋大学;2013年

6 郭梦尧;黄芩苷对小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎的作用及机制研究[D];吉林大学;2014年

7 代平;文蛤（Meretrix meretrix）选育群体的遗传测定及生长相关SNP鉴定[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2014年

8 尚桂军;铜绿假单胞菌T6SS效应蛋白Tse3和人天然免疫蛋白STING结构和功能研究[D];山东大学;2014年

9 王知知;烟粉虱抗菌肽和肽聚糖识别蛋白PGRP在双生病毒传播中作用的探讨[D];浙江大学;2014年

10 唐文婷;基于肽—膜相互作用的模拟细胞膜法筛选抗菌肽的研究[D];江南大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 尹金凤;溶菌酶对大肠杆菌的抗菌作用机制及其增效技术的研究[D];江南大学;2011年

2 张洪伟;克氏原螯虾无脊椎动物型溶菌酶的分子克隆与功能分析[D];山东大学;2011年

3 潘俊丽;文昌鱼天然免疫探索：体液的调理作用以及溶菌酶基因克隆[D];中国海洋大学;2011年

4 李义;重组人溶菌酶的抑菌活性及对小鼠肠道菌群结构影响的研究[D];西北农林科技大学;2012年

5 王武刚;酵母提取物替代鱼粉在凡纳滨对虾饲料中的应用研究[D];上海海洋大学;2012年

6 蒋锦坤;壳聚糖对虹鳟（Oncorhynchus mykiss）和星斑川鲽（Platichthys stellatus）幼鱼生长及非特异性免疫的影响[D];上海海洋大学;2012年

7 易瑞恺;鄱阳湖克氏原螯虾种质指标的初步研究[D];南昌大学;2013年

8 瞿兰;罗非鱼Lysozyme-C3基因在斑马鱼中的转植研究[D];上海海洋大学;2013年

9 万圣;犬子宫蓄脓4种细菌多重PCR检测方法的建立及溶菌酶抑菌效果观察[D];山东农业大学;2013年

10 谷跃峰;海参溶菌酶在毕赤酵母中的表达及生物活性研究[D];大连工业大学;2010年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 朱江,吴祥甫;昆虫杆状病毒表达系统研究进展及其应用展望[J];蚕业科学;2003年02期

2 文彩虹,曲传智,李东英,张晓琴;家蝇免疫血淋巴对SMMC-7721肝癌细胞超微结构和增殖周期的影响[J];河南肿瘤学杂志;2004年02期

3 国果;吴建伟;付萍;张勇;宋玉竹;宋智魁;;家蝇幼虫分泌物抗菌肽的生化特性初步研究[J];昆虫学报;2006年06期

4 宫霞;胡树凯;乐国伟;;家蝇幼虫抗菌肽MDL-2的电泳制备及其抗菌作用机理[J];昆虫学报;2007年12期

5 刘彬;黄文;张洁;艾辉;雷朝亮;;家蝇幼虫提取物清除氧自由基的作用[J];昆虫知识;2006年01期

6 孙恩涛;秦志辉;;昆虫抗菌肽研究进展[J];热带病与寄生虫学;2006年01期

7 王婷婷;金小宝;朱家勇;刘雷山;;顺式串联家蝇抗菌肽Attacin基因真核表达载体的构建[J];中国热带医学;2006年03期

8 ;Multi-peak Phenomenon of Insect Cell Infection with Baculovirus at Low Multiplicity of Infection[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2005年12期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 唐金花;苦参等中草药的抑菌作用、机理研究及对鸡大肠杆菌病的防治效果分析[D];辽宁师范大学;2006年

，

本文编号：618886