基于iMLDR技术的耳聋基因突变热点的新型快速检测方法研究

发布时间：2017-08-07 15:27

  本文关键词：基于iMLDR技术的耳聋基因突变热点的新型快速检测方法研究

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【摘要】：目的：遗传性耳聋临床表现多种多样、个体差异大、致病基因多,且目前已定位130多个耳聋基因位点、发现千余种基因突变类型,因此,现有的技术方法根本无法为广大遗传性耳聋患者提供准确的诊断；而随着更多的耳聋致病基因被克隆、更多新的基因突变类型被发现,遗传性耳聋的诊疗将面临巨大的困难。我们使用iMLDR技术首次对遗传性耳聋进行筛查,对117例2012-2013年的有可能为遗传性耳聋的患者进行筛查。并了解该技术在遗传性耳聋筛查工作中的实用性。 方法：我们首先查找相关文献,确定30个耳聋的高发突变位点,然后进行探针设计,并测试探针结合性能,对探针进行优化。随后对181个样本进行使用iMLDR技术检测及验证,对其结果进行分析。 结果：我们对49例已确定为阳性的耳聋样本、117例新收耳聋患者及15例正常人样本使用iMLDR技术进行检测,直接测序验证结果提示假阳性及假阴性率为0,在117例新收耳聋患者中可基本确认为非综合征遗传性聋的有18例,提示可能由遗传因素所致耳聋的有23例。 结论：1.iMLDR技术与同类技术对比具有检测成本低,检测范围广、分型准确,使用灵活的特点。我们认为该新技术在产前诊断及对大批量耳聋患者进行筛查方面有较大的使用价值。 2.SLC26A4_His723Arg[A/G]_PSorEVAorNSR杂合突变可能与其它突变位点共同作用导致耳聋发生。
【关键词】：耳聋 基因 新型多重酶连接反应 突变
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R764.43;R3416
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-7
• 1 引言7-9
• 2 研究对象9-11
• 3 材料与方法11-19
• 3.1 仪器与试剂11-12
• 3.1.1 主要仪器11
• 3.1.2 实验试剂与耗材11-12
• 3.2 实验方法12-19
• 3.2.1 DNA样本的收集12
• 3.2.2 耳聋患者DNA提取12-13
• 3.2.3 检测位点的选择13-14
• 3.2.4 探针设计优化及检测14
• 3.2.5 应用iMLDR技术对样本进行检测14-19
• 4 结果19-23
• 5 讨论23-28
• 6 结论28-29
• REFERENCES29-32
• 7 综述32-44
• References41-44
• 致谢44-45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 戴朴;韩东一;冯勃;康东洋;刘新;袁慧军;曹菊阳;张昕;翟所强;杨伟炎;吴柏林;;大前庭水管综合征的基因诊断和SLC26A4基因突变分析[J];中国耳鼻咽喉头颈外科;2006年05期

2 袁永一;王国建;黄德亮;康东洋;戴朴;;大前庭水管相关SLC26A4基因热点突变区域筛查方案探讨[J];中华耳科学杂志;2010年03期

3 刘新;戴朴;黄德亮;袁慧军;李为民;曹菊阳;于飞;张锐宁;林红艳;朱秀辉;何勇;虞幼军;姚昆;;线粒体DNAA1555G突变大规模筛查及其预防意义探讨[J];中华医学杂志;2006年19期

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本文编号：635336