血小板源性生长因子-BB对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖、迁移及表型转化的影响

发布时间：2017-08-08 03:14

  本文关键词：血小板源性生长因子-BB对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖、迁移及表型转化的影响

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【摘要】：目的了解血小板源性生长因子-BB(PDGFBBB)对大鼠阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞增殖、迁移及表型转化的影响并初步探讨其作用机制。方法采用改良的组织块培养法培养Wistar大鼠CCSM细胞,并用细胞免疫荧光法鉴定。利用CCK-8法检测不同浓度的PDGFBB对培养的大鼠CCSM细胞增殖的影响,并筛选出最适PDGFBB作用浓度。分别用0 ng/m L PDGFBB与最适浓度PDGFBB处理CCSM细胞,利用划痕实验检测PDGFBB对CCSM细胞迁移的影响,24 h和48 h时利用q RT-PCR检测细胞中转录因子myocardin及收缩型表型标志物α-SMA、SMMHC mRNA表达水平;用最适浓度PDGFBB处理CCSM细胞0、24和48 h后,利用western blotting检测细胞中myocardin的蛋白表达水平。结果原代培养的CCSM细胞中α-SMA和smoothelin阳性率分别约为96.5%和96%;不同浓度的PDGFBB均能明显促进CCSM细胞增殖,其最适浓度为12.5 ng/m L。PDGFBB(12.5 ng/m L)能促进CCSM细胞迁移,下调CCSM细胞中myocardin、α-SMA和SMMHC mRNA表达水平(P均0.01);在48 h内myocardin蛋白质的表达水平随着PDGFBB作用时间增加而降低。结论改良的组织块培养法可获得高纯的CCSM细胞;PDGFBB可促进CCSM细胞增殖、迁移,使细胞从收缩型向合成型转化,其机制可能是通过下调myocardin。
【作者单位】： 南方医科大学南方医院惠侨楼一病区;
【关键词】： 血小板源性生长因子-BB 阴茎海绵体平滑肌细胞 表型转化
【基金】：国家自然科学基金(81170566) 广东省自然科学基金(S2012010009091)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 血小板源性生长因子(platelet-derived growthfactor,PDGF)是体内一种主要的促有丝分裂剂,可以刺激多种组织细胞增殖、迁移。PDGFBB属于PDGF家族,可由内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞、某些肿瘤细胞等多种细胞分泌,在PDGF家族成员中,仅PDGFBB能结合所有PDGF受体,使受体磷酸化,

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本文编号：637971