利用Gibson Assembly技术构建乙型肝炎病毒1.1倍体复制子

发布时间：2017-08-08 14:09

  本文关键词：利用Gibson Assembly技术构建乙型肝炎病毒1.1倍体复制子

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【摘要】：乙型肝炎病毒(HBV)基因组各开放阅读框高度重叠,因此构建可在体外细胞模型中复制的HBV DNA质粒至少要包含1.1倍以上的HBV基因组.构建HBV1.1倍体复制子的传统克隆方法涉及多步DNA酶切/连接,操作复杂,耗时较长.本研究发展了基于新型克隆技术Gibson Assembly构建HBV1.1倍体复制子质粒的新方法,在获得HBV基因组DNA后仅需1步体外装配即可完成,利用这一方法,本研究成功从4份HBV感染者标本中获得HBV1.1倍体复制子,并通过瞬时转染Huh7细胞,证明其能够支持HBV的体外复制.本研究为从临床标本中快速获得HBV复制子克隆以研究病毒表型功能提供了更为高效的新方法.
【作者单位】： 厦门大学公共卫生学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心;
【关键词】： 乙型肝炎病毒 Gibson Assembly .倍体
【分类号】：R373.21
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是世界范围内重要的公共卫生问题之一[1].它通过血液、体液等传播,HBV感染可导致急性或者慢性感染,急性感染有可能引起暴发性肝病,导致死亡,而对于慢性感染人群,则患肝硬化或肝癌的概率大大上升,全球慢性乙肝患者已经超过2亿4千万人,

【共引文献】

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【相似文献】

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本文编号：640359