人脂肪干细胞的提取和鉴定

发布时间：2017-08-09 09:06

  本文关键词：人脂肪干细胞的提取和鉴定

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【摘要】：背景:脂肪干细胞是存在于脂肪中的全能干细胞,具备自我更新能力与多向分化潜能,遗传背景相当稳定,体内植入后免疫排斥少,是一种比较理想的种子细胞。目的:提取人大网膜脂肪干细胞,并进行成脂和成骨分化能力鉴定。方法:收集手术患者大网膜的脂肪组织,经Ⅰ型胶原酶消化、过滤、离心后进行原代培养,观察细胞生长状态;用细胞计数法绘制人脂肪干细胞增殖曲线,计算处于对数生长期的倍增时间;用相应的定向诱导液诱导人脂肪干细胞向脂肪细胞及骨细胞方向分化,并用油红O染色、茜素红染色进行鉴定。结果与结论:从手术患者大网膜脂肪组织中成功分离人脂肪干细胞,贴壁生长的人脂肪干细胞为长梭形,形态类似成纤维细胞。第3代人脂肪干细胞生长曲线呈S形,对数生长期人脂肪干细胞的倍增时间为45.90 h。人脂肪干细胞经成脂、成骨定向诱导分化2,3周后,油红O染色显示细胞内有大小不等的橘红色脂肪滴,茜素红染色可见着橘红色的典型钙化结节,提示所培养的脂肪干细胞具有向脂肪细胞、骨细胞系分化的能力。
【作者单位】： 中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院老干头颈内科;中南大学湘雅三医院内分泌科;中南大学湘雅三医院营养科;
【关键词】： 脂肪组织 干细胞 胶原酶类 细胞 培养的 细胞分化 脂肪干细胞 诱导分化 人脂肪干细胞 Ⅰ型胶原酶 生长曲线 脂肪细胞 骨细胞 大网膜 油红O染色 茜素红染色
【基金】：湖南省科技厅项目(2013SK3060)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction块,0.2%Ⅰ型胶原蛋白酶消化后加入等体积培养基,200脂肪干细胞是脂肪组织中存在、类似骨髓基质细胞的目筛网过滤,收集滤液并离心,弃上清后加入3 m L红细胞间充质干细胞,具备自我更新能力与多向分化潜能,遗传裂解液吹打5 min,离心弃上清,PBS反复冲洗后在DMEM

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：644462