基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法的建立

发布时间：2017-08-11 02:27

  本文关键词：基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法的建立

  更多相关文章： 百日咳疫苗 效价 Luminex 多重检测 酶联免疫吸附测定

【摘要】：目的建立基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法。方法将百日咳类毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)、百日咳杆菌黏附素(pertactin,PRN)、百日咳菌鞭毛蛋白2,3型(fimbrial-2 and fimbrial-3,FIM 2,3)分别与4种不同型号的微球耦联,耦联的抗原在同一孔中与血清孵育,通过生物素标记抗体和链霉素标记藻红蛋白双重识别,用Luminex荧光检测得到荧光中位数值(MFI),进行效价分析,并通过百日咳标准血清建立五组分百日咳疫苗血清抗体检测的标准曲线。采用ELISA法检测同一组血清样品中的抗体效价,并对两种方法的检测结果进行比较。结果与ELISA法相比,Luminex法的线性范围更宽。两种方法检测五组分百日咳疫苗血清抗体效价的分布范围接近,Luminex法检测50份五组分百日咳疫苗免疫小鼠血清抗体效价的平均值分别为PT 65.365 IU/ml、FIM 15.052 IU/ml、FHA 545.236 IU/ml、PRN 7.876 IU/ml,ELISA法检测的平均值分别为PT 72.640 IU/ml、FIM 16.480 IU/ml、FHA 589.474 IU/ml、PRN 7.345 IU/ml,两种检测方法的检测结果具有良好的相关性,相关系数(R2)分别为:PT 0.905 8、FIM 0.979 1、FHA 0.930 9、PRN 0.997 6。结论与ELISA法相比,基于Luminex的多重分析物的检测方法具有减少样品消耗量、节省成本和测定时间、使多种目标分子之间相关性的分析更准确等优点,可用于五组分百日咳疫苗血清抗体效价的检测。
【作者单位】： 天津科技大学;中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室;天津康希诺生物技术有限公司天津市呼吸道细菌重组及结合疫苗企业重点实验室;
【关键词】： 百日咳疫苗 效价 Luminex 多重检测 酶联免疫吸附测定
【基金】：863计划“基因重配多价轮状病毒等新型疫苗研发技术及产品研发”(2012AA02A401)
【分类号】：O657.3;R392-33
【正文快照】： 百日咳是一种严重威胁婴幼儿健康的呼吸道传染性疾病,即使在疫苗接种覆盖率较高的国家,百日咳仍是一个深受关注的公共卫生问题[1]。最早使用的百日咳疫苗为全细胞疫苗,虽然这种疫苗具有良好的保护效果,但在接种过程中会伴随较严重的副作用[2],因此,自20世纪80年代以来,全细胞

【相似文献】

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 孔祥峰;胡元亮;芮荣;王德云;李祥瑞;;中药成分对免疫雏鸡外周血淋巴细胞转化和血清抗体效价的影响[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集（下册）[C];2004年

，

本文编号：653841