靶向MUC1肿瘤治疗性疫苗的制备和功能研究

发布时间：2017-08-12 15:36

  本文关键词：靶向MUC1肿瘤治疗性疫苗的制备和功能研究

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【摘要】：目的制备一种能高效激活免疫细胞的肿瘤疫苗,提高免疫细胞杀伤肿瘤细胞的功能。方法同源重组表达含人免疫球蛋白(Ig G)Fc片段的MUC1蛋白作为抗原,并利用DOTAP阳离子脂质体包被抗原呈递给体外诱导培养的树突状细胞(DC),然后用DC细胞激活产生特异性免疫应答的T细胞,检测T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。结果成功构建含人免疫球蛋白(Ig G)Fc片段的MUC1蛋白表达载体,经大肠杆菌成功表达目的蛋白并纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳验证得到目的蛋白条带。抗原蛋白经DOTAP阳离子脂质体包被,包封率达到97%。包被后的抗原刺激体外培养的免疫细胞,流式细胞术检测发现1~40μg/ml抗原制剂均能有效激活产生免疫应答,并显著增加功能性肿瘤杀伤细胞亚群比例,联合对肿瘤细胞(MCF-7)杀伤功能分析实验,10μg/ml疫苗制剂效果最佳,能提高免疫细胞对肿瘤细胞杀伤率45%以上。结论制备的疫苗制剂能有效被DC细胞捕获,并激活产生特异性应答的功能性肿瘤杀伤细胞,显著提高了免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤功能。
【作者单位】： 深圳市中联生物科技开发有限公司;深圳市晋百慧生物有限公司;上海道培医院检验科;
【关键词】： MUC 肿瘤治疗性疫苗 阳离子脂质体
【基金】：深圳市海外高层次人才创新创业专项资金(KQCX20120806161031208)
【分类号】：R392.12
【正文快照】： 肿瘤细胞表面的抗原多肽能够有效激活机体的免疫应答,其可以通过DC细胞呈递作用引发细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应[1]。MUC1是由muc1基因表达的一种高糖基化(糖基化大于50%)、高相对分子质量(Mr2×105)蛋白,是一种跨膜分子[2-3]。糖基化不完全的MUC1广泛分布(90%的实体瘤和多种

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本文编号：662373