亚低温对巨噬细胞TLR4受体mRNA转录及炎症平衡的影响
发布时间：2017-08-13 16:39
本文关键词：亚低温对巨噬细胞TLR4受体mRNA转录及炎症平衡的影响
【摘要】：目的:探讨亚低温减轻肺损伤的可能机制之一，是通过下调TLR4的转录和翻译，并进一步的减少下游促炎症介质的分泌量，保留更多的抗炎症介质如IL-10。 方法:实验用RAW264.7小鼠巨噬细胞株，以DMED培养基培养细胞，添加10%胎牛血清。待细胞达到1×106/ml时，将细胞分别置于37℃和32℃的温育箱中，在干预组加入10ng/mL LPS，对照组加入等量生理盐水，其它条件保持一致。分别于培养2、8、24h进行测定，取细胞上清液检测白细胞介素（IL-1β、IL-10）水平。用Trizol提取细胞总RNA，通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测TLR4mRNA的转录水平。 结果: LPS干预下，常温组TLR4的mRNA亚低温组TLR4的mRNA转录水平均先升高后下降；同一时间点，亚低温组TLR4mRNA转录水平均低于常温组（2h：9.19±0.57比10.08±1.02， P＝0.036；8h：13.58±1.57比15.24±1.63，P＝0.042；24h：6.85±1.17比8.17±1.21，P＝0.032）。LPS干预下，常温组和亚低温组随时间延长IL-1β、IL-10均逐步增高；同一时间点，常温组IL-1β水平显著高于亚低温组，IL-10明显低于治疗性亚低温组。随时间延长，常温组IL-1β/IL-10的比值逐渐升高；治疗性亚低温组IL-1β/IL-10比值逐渐降低。同一时段，IL-1β/IL-10值亚低温组低于常温组（2h:0.740±0.214比0.993±0.256,P=0.037;8h:0.701±0.363比1.237±0.455,P=0.014;24h：0.493±0.292比2.099±0.428,P0.001）。 结论:亚低温可降低LPS干预下巨噬细胞TLR4mRNA的转录水平，，相对降低IL-1β水平，但保留了更高水平的IL-10，使炎症趋向抗炎方向发展。
【关键词】：亚低温 脂多糖 TLR4 巨噬细胞
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R363
【目录】：
- 英文缩略词4-6
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 前言10-12
- 材料和实验方法12-23
- 结果23-30
- 讨论30-39
- 实验结论39-40
- 参考文献40-46
- 综述46-68
- 参考文献60-68
- 致谢68
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