裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析

发布时间：2017-08-16 03:23

  本文关键词：裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析

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【摘要】：目的通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性。方法将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21(DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性。结论成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白。
【作者单位】： 中国农业科学院上海兽医研究所;贵州大学动物科学学院;上海农林职业技术学院;
【关键词】： 裂谷热病毒 Gn蛋白 原核表达 蛋白纯化
【基金】：国家科技支撑计划(2013BAD12B05) 国家自然科学基金(31302116) 上海高校青年教师培养资助计划(ZZnlzl2003) 上海农林职业技术学院院级科研项目(091227)~~
【分类号】：R373
【正文快照】： (1.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,China;2.College of Animal Science,Guizhou University,Guiyang550025,China;3.Department of Animal Science and Technology,Shanghai Vocationaland Technical Col

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本文编号：681242