用非整合重编程技术构建人外周血单个核细胞来源的诱导多能干细胞
本文关键词:用非整合重编程技术构建人外周血单个核细胞来源的诱导多能干细胞
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【摘要】:目的用非整合重编程技术构建人外周血单个核细胞(PBMC)来源诱导多能干细胞(i PSC)。方法收集健康人外周血标本,分离PBMC,用含4个重编程转录因子(OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC)的仙台病毒感染PBMC,并用无饲养层细胞的培养体系培育获得i PSC。通过细胞形态学、碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色、拟胚体形成和分化实验对i PSC细胞进行多能性验证;用核型分析和仙台病毒基因组RNA检测对其进行安全性验证。结果在仙台病毒感染后16 d后,PBMC出现i PSC样克隆。i PSC可进行传代培养,且经多能性验证实验证明其具有多能性;安全性验证结果表明,i PSC核型正常,外源性病毒基因组RNA可被完全清除。结论建立了对PBMC进行非整合重编程的诱导体系,并获得了具有多能性、核型正常且不含外源基因的i PSC。
【作者单位】: 南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心;
【关键词】: 人外周血单个核细胞 重编程 诱导多能干细胞 非整合 仙台病毒
【基金】:国家自然科学基金(81300495) 江苏省临床医学重点项目(BL2012039) 江苏省卫生厅科学项目(H201343)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 2006年,日本科学家Shinya Yamanaka首次通过4个重要的转录因子OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC实现对已分化体细胞的重编程,从而得到与胚胎干细胞类似的诱导多能干细胞(i PSC)[1]。目前,包括皮肤成纤维细胞、脂肪细胞、牙髓细胞等在内的人类细胞重编程技术已非常完善[2-4],然而,对
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,本文编号:684057
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