血红素加氧酶-1基因敲除小鼠的饲养和鉴定
本文关键词:血红素加氧酶-1基因敲除小鼠的饲养和鉴定
【摘要】:目的繁殖并鉴定HO-1基因敲除(HO-1-/-)小鼠。方法将引进的HO-1基因敲除杂合子小鼠,进行SPF级饲养,与C57BL/6野生型小鼠配种繁殖,提取子代小鼠的基因组DNA,PCR法特异性扩增HO-1基因片段,使用双脱氧测序法测得基因序列。子代小鼠出现3种基因型:野生型、杂合子型及纯合子型。杂合子小鼠进一步配种繁殖,以获得更多的基因敲除纯合子小鼠,纯合子小鼠用以课题研究。结果 HO-1基因敲除杂合子小鼠的饲养和繁殖均获得成功,获得了HO-1基因敲除纯合子和杂合子小鼠。结论正确的饲养繁殖及鉴定方法是从HO-1基因敲除杂合子小鼠中获得纯合子小鼠的有效途径。
【作者单位】: 中国人民武装警察部队心脏医院;天津市心血管重塑与靶器官损伤重点实验室;中国人民武装警察部队后勤学院附属医院呼吸与重症医学科;
【关键词】: 基因敲除小鼠 HO- 纯合子 杂合子
【基金】:国家自然科学基金(No.81102088) 天津市自然科学基金(No.12JCYBJC16600) 武警后勤学院附属医院种子基金(No.FYM201538)
【分类号】:R-332
【正文快照】: (3.天津市心血管重塑与靶器官损伤重点实验室,天津300162)血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)是参与体内血红素代谢重要的起始酶和限速酶,可以降解胞浆中的血红素,生成胆绿素、一氧化碳(carbonmonoxide,CO)和铁。HO有3种亚型,其中HO-1为诱导型,在高热、高氧、内毒素和炎性因子等
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,本文编号:693102
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