ACEI和ARB抑制增殖作用对损伤肾小管上皮细胞再生修复的影响及机制

发布时间：2017-08-18 22:21

  本文关键词：ACEI和ARB抑制增殖作用对损伤肾小管上皮细胞再生修复的影响及机制

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【摘要】：目的：通过研究福辛普利(Val)和缬沙坦(Val)对肾小管上皮细胞损伤后再生修复的影响，探讨血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和血管紧张素受体1型受体拮抗剂(ARB)抑制增殖作用在其诱导急性肾损伤中的作用及其机制。 方法：含5%胎牛血清的DMEM/F12培养基体外培养肾近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)，建立细胞缺氧复氧模型。Fos(10μmol/L)、Val(10μmol/L)及Fos联合Val干预正常及缺氧复氧后HK-2细胞48h，倒置显微镜下观察各组细胞并拍照，MTS比色法及Brud掺入法检测细胞增殖，Elasa检测细胞培养上清液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度，实时荧光定量PCR检测血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素转换酶2(ACE2)、血管紧张素1型受体(AT1R)和血管紧张素2型受体(AT2R)mRNA的表达，Western bloting检测ACE2、AT1R和AT2R蛋白的表达；另外，AT2R拮抗剂PD123319(1μmol/L)和Val(10μmol/L)干预正常及缺氧复氧后HK-2细胞48h，同上方法观察各组细胞并拍照，检测细胞增殖和细胞培养上清液中AngⅡ的浓度，Western bloting检测AT1R和AT2R蛋白的表达。 结果：(1) HK-2细胞缺氧3h，复氧24h后细胞活力下降最显著(P0.001)，细胞毒性最大(P0.001)，AT2R表达上调(P0.05)；(2)缺氧复氧处理后，Fos和Fos联合Val干预使细胞增殖活力下降(P0.05)，BrdU掺入率减少(P0.05)，ACEmRNA表达下调(P0.05)，细胞培养上清液中AngⅡ的浓度下降(P0.05)，且与细胞增殖活力呈显著正相关(P0.001)；(3)缺氧复氧处理后，Val干预细胞增殖活力未被抑制(P0.05)，，BrdU掺入率也无差异(P0.05)，AT1R表达下调(P0.05)；(4)缺氧复氧处理后，PD123319干预使细胞增殖活力下降(P0.05)，AT2R蛋白的表达下调(P0.05)。 结论：(1) HK-2细胞缺氧复氧后可模拟肾小管上皮细胞损伤过程；(2)ACEI抑制肾小管上皮细胞损伤后的再生修复；(3)ARB对肾小管上皮细胞损伤后的再生修复无明显抑制作用；(4) PD123319抑制肾小管上皮细胞损伤后的再生修复。
【关键词】：急性肾损伤 血管紧张素Ⅱ 血管紧张素转换酶抑制剂 血管紧张素1型受体拮抗剂 血管紧张素2型受体拮抗剂
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
【目录】：

• 目录3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 英文缩略词表9-10
• 引言10-12
• 第一部分：福辛普利和缬沙坦对损伤肾小管上皮细胞增殖再生的影响12-43
• 1．材料与方法12-25
• 1.1 实验材料12-17
• 1.2 实验方法17-25
• 2、结果25-39
• 2.1 正常细胞生长曲线25
• 2.2 HK 2 细胞缺氧/复氧模型的建立25-28
• 2.3 各组 HK-2 细胞的增殖活性28-30
• 2.4 各组 HK-2 细胞培养上清液中 AngⅡ的浓度30-32
• 2.5 各组 HK-2 细胞 ACE、ACE2、AT1R 和 AT2R mRNA 的表达32-35
• 2.6 各组细胞 ACE2、AT1R 和 AT2R 蛋白的表达35-39
• 3 讨论39-43
• 3.1 建立缺氧复氧模型39
• 3.2 ACEI 抑制肾小管上皮细胞损伤后的再生修复39-41
• 3.3 ARB 对肾小管上皮细胞损伤后的再生修复无明显抑制41-43
• 第二部分：AT2R 拮抗剂 PD123319 对损伤肾小管上皮细胞再生修复的影响43-52
• 1.材料与方法43-45
• 1.1 实验材料43
• 1.2 实验方法43-45
• 2.结果45-50
• 2.1 各组 HK 2 细胞的增殖活性45-46
• 2.2 各组 HK-2 细胞细胞培养上清液中 AngⅡ的浓度46-47
• 2.3 各组 HK-2 细胞 AT1R 和 AT2R 蛋白的表达47-50
• 3.讨论50-52
• 3.1 PD123319 抑制肾小管上皮细胞损伤后的再生修复50-52
• 结论52-53
• 参考文献53-58
• 致谢58-59
• 综述59-64
• 参考文献62-64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：697100