shRNA表达载体对HSV-2 ICP4基因的干扰效应

发布时间：2017-08-23 15:35

  本文关键词：shRNA表达载体对HSV-2 ICP4基因的干扰效应

  更多相关文章： RNA干扰 短发夹RNA 质粒载体 Ⅱ型单纯疱疹病毒 ICP基因

【摘要】：目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,Western blot检测ICP4蛋白的表达情况,终点滴定法测定病毒的滴度。结果与对照组相比,干扰组对mRNA抑制率为71%,使蛋白表达减少71.81%,并且病毒滴度也明显降低(P0.05)。结论构建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重组质粒表达载体能在体外细胞水平上干扰HSV-2 ICP4的基因表达,抑制HSV-2在细胞中复制。
【作者单位】： 遵义医学院珠海校区;
【关键词】： RNA干扰 短发夹RNA 质粒载体 Ⅱ型单纯疱疹病毒 ICP基因
【基金】：贵州省优秀科技教育人才首长专项资金项目(NO:2009122)
【分类号】：Q78
【正文快照】： 生殖器疱疹(Genital herpes,GH)是一种易复发、难治愈的性传播疾病,Ⅱ型单纯疱疹病毒(Her-pes simplex virus type 2,HSV-2)是GH的主要病原体。目前,对HSV-2感染,主要使用阿昔洛韦和无环鸟苷等广谱抗病毒药物,这种控制无特异性,且病毒抗药性有逐渐增加的趋势,治疗效果并不理想

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 孙申;高秀先;朱圆圆;朱孝先;袁红花;高殿帅;;钙粘附蛋白N-cadherin基因RNAi质粒载体的构建与鉴定[J];神经解剖学杂志;2010年02期

2 刘建功;王江涛;解军;;RNA干扰技术对PC12细胞CaMKⅡβ基因表达的影响[J];中国生物工程杂志;2008年02期

3 周蔚;徐忠伟;王凤梅;陈小义;呼文亮;徐瑞成;;靶向钠钾ATP酶α1亚单位shRNA质粒表达载体的构建与筛选[J];生物技术通报;2010年11期

4 张丽杰;赵振军;鹿刚;单保恩;;靶向STAT5的RNAi重组质粒的构建与鉴定[J];临床检验杂志;2011年03期

5 张祥;张震宇;唐佩福;孔祥丽;黄鹏;金萌萌;于爱平;;NaCl浓度和茎环内的碱基结构对shRNA退火影响的研究[J];生物医学工程与临床;2010年02期

6 刘明,刘国庆;RNA干扰的应用及其意义[J];生物学通报;2005年06期

7 郝华;李美宁;赵志兰;杜叶平;秦立元;程牛亮;;靶向Pin1基因的shRNA干扰质粒的构建及其对大肠癌SW620细胞Pin1基因的抑制作用[J];中国生物制品学杂志;2009年03期

8 叶健;刘利新;薛远;曲静;高光侠;方荣祥;;针对leader序列的siRNA能够有效抑制SARS冠状病毒多个mRNA的表达(英文)[J];生物化学与生物物理进展;2007年10期

9 李正伟;白云深;任宪盛;杨有庚;;靶向RhoA基因的shRNA质粒表达载体的构建与鉴定[J];中国老年学杂志;2009年02期

10 吴春婷;赵佳晖;闫树凤;靳丽妍;朱光发;;针对核因子-κBP65基因的短发夹干扰RNA逆转录病毒载体构建与鉴定[J];现代生物医学进展;2009年08期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 吴云成;赵永波;蔡友庆;刘文文;费俭;;Nurr1短发夹RNA表达载体的构建及其对多巴胺能细胞中内源基因的干扰作用[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年

2 吴云成;蔡友庆;刘文文;赵永波;;Nurr1在多巴胺能细胞中的表达及其短发夹RNA表达载体的构建与鉴定[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

3 吴云成;赵永波;刘文文;;短发夹RNA对多巴胺能细胞株外源绿色荧光蛋白基因表达的影响[A];2005年中国神经心理学学术会议论文集[C];2005年

4 周兰兰;蒋义国;谭爱军;沈月兰;刘林华;杨巧媛;;N-Ras基因靶向的shRNA抑制二羟环氧苯并芘诱导的恶变细胞增殖[A];中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第六届全国学术会议、中国毒理学会遗传毒理专业委员会第五届全国学术会议、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术会议、广东省环境诱变剂学会学术会议论文汇编[C];2008年

5 周兰兰;蒋义国;谭爱军;沈月兰;刘林华;杨巧媛;;shRNA沉默二羟环氧苯并芘诱导的恶变细胞中N-Ras基因表达[A];中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第六届全国学术会议、中国毒理学会遗传毒理专业委员会第五届全国学术会议、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术会议、广东省环境诱变剂学会学术会议论文汇编[C];2008年

6 蒋义国;周兰兰;沈月兰;刘林华;;N-Ras shRNA抑制二羟环氧苯并芘恶性转化细胞增殖[A];第十届中国科协年会论文集（三）[C];2008年

7 张慧;范列英;卢天宝;宗明;;RNAi表达载体干扰四型肽精氨酸脱亚氨基酶基因在HL-60细胞系中的表达[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

8 张辉;于力;朱龙英;万延慧;朱为民;;Hair-pin RNA介导的番茄抗TYLCV效果初步研究[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年

9 李艳;严明;;RNA干扰[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年

10 闫虎斌;陆智明;;基于RNA干扰的植物抗病毒育种原理及研究进展[A];中国柑橘科技创新与产业发展战略论坛暨中国柑橘学会2007年年会论文集[C];2007年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 徐铮奎;RNA干扰剂即将浮出市面[N];医药经济报;2004年

2 余志平;打开功能基因组学与未来治疗学的大门[N];中国医药报;2004年

3 李彬;今年技术发展呈八大趋势[N];科技日报;2005年

4 记者 吴伟农;世界十大科技突破[N];新华每日电讯;2001年

5 本报记者 韦绍锋 邢少文 康义文 康义瑶（实习） 驻地记者 胡勇;生物医药“海归”之惑[N];医药经济报;2004年

6 曹丽君;RNA干扰技术取得突破[N];健康报;2004年

7 胡永生;今年的热门技术[N];科技日报;2004年

8 记者王艳红;让致病基因“沉默”[N];人民日报;2003年

9 驻京记者 王勇;让致病基因“沉默”[N];文汇报;2003年

10 记者 王艳红;致病基因可以“沉默”[N];新华每日电讯;2003年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 魏军民;RNA干扰逆转肿瘤多药耐药的实验研究[D];山东大学;2005年

2 贺云霞;应用RNAi技术抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的研究[D];中国农业科学院;2006年

3 主余华;RNA干扰抑制肝星状细胞CTGF表达的实验研究[D];山东大学;2006年

4 李恭会;shRNA阻抑前列腺癌细胞雄激素受体和hTERT基因表达的研究[D];浙江大学;2005年

5 王晓龙;小鼠骨骼肌细胞SelW基因的RNA干扰研究[D];东北林业大学;2006年

6 王静;转化生长因子-β1基因沉默对人涎腺粘液表皮样癌Ms细胞生物学行为的影响[D];第四军医大学;2006年

7 张守峰;狂犬病病毒的RNA干扰研究[D];吉林大学;2007年

8 王鹏雁;口蹄疫病毒干扰RNA转基因小鼠模型的构建[D];石河子大学;2008年

9 谭兵;RNA干扰在体外、体内抑制TNF-α表达的实验研究[D];广州医学院;2008年

10 倪勤;shRNA表达框的快速制备及其在抗HBV相关研究中的应用[D];浙江大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 刘中华;RANi沉默人宫颈癌细胞HSF1基因增强细胞辐射敏感性的实验研究[D];苏州大学;2008年

2 胡礼仪;多药耐药基因MDR1短发夹状RNA表达质粒的构建与鉴定[D];武汉大学;2005年

3 费春梅;VEGF shRNA表达质粒抑制血管内皮细胞VEGF表达及角膜新生血管的研究[D];重庆医科大学;2009年

4 秦维超;shRNA逆转肝癌耐药细胞多药耐药的实验研究[D];武汉大学;2005年

5 周星娟;大鼠RAG1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定[D];浙江大学;2008年

6 刘加群;两种不同肝纤维化相关细胞因子shRNA表达载体的构建[D];泸州医学院;2009年

7 张国英;RNA干扰对HepG2细胞AFP基因表达的影响[D];山西医科大学;2005年

8 郑志刚;短发夹RNA特异及交叉抑制胰腺癌细胞PANC-1和Miapaca-2突变型K-ras基因表达的实验研究[D];河北医科大学;2008年

9 杨光天;RNA干扰抑制survivin基因诱导前列腺癌细胞凋亡的实验研究[D];苏州大学;2005年

10 王建伟;RNA干扰技术抑制基质金属蛋白酶-26表达对人肺癌A549细胞的影响[D];吉林大学;2006年

，

本文编号：725854