新生小鼠心脏细胞体外共培养体系的建立及其在心肌细胞增殖研究中的应用

发布时间：2017-08-25 04:07

  本文关键词：新生小鼠心脏细胞体外共培养体系的建立及其在心肌细胞增殖研究中的应用

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【摘要】：目的建立新生C57乳鼠心肌细胞和成纤维细胞体外原代培养和共培养体系,探讨不同日龄乳鼠心脏细胞的体外增殖特征。方法分离不同日龄C57新生小鼠的心肌细胞和成纤维细胞,分别进行原代培养和共培养,观察细胞的形态和活力变化,测定Cyclin D1、CDK4、GATA4、Nkx2.5以及FGF1的表达。结果差速贴壁90 min后成纤维细胞先贴壁,培养12 h后心肌细胞几乎全部贴壁;共培养心肌细胞多以细胞团的形式贴壁生长。出生5 d以内的乳鼠心肌细胞数量明显增加,共培养的心肌细胞活力更大、增殖速度快;出生5 d以后乳鼠的心肌细胞数量变化并不明显。出生5 d内乳鼠心肌细胞中Cyclin D1和CDK4的表达量较高,且共培养的心肌细胞表达量要高于单独培养的心肌细胞表达量。GATA4、Nkx2.5和FGF1的表达随日龄增大而增加。结论成功建立了新生小鼠心肌细胞和成纤维细胞的体外共培养体系;出生5 d内的乳鼠心肌细胞体外培养时具有较强的增殖能力,且成纤维细胞能促进心肌细胞的增殖,GATA4、Nkx2.5和FGF1有阻止心肌细胞增殖作用。出生5 d后乳鼠的心肌细胞增殖能力减弱甚至消失。
【作者单位】： 第二军医大学热带医学与公共卫生学系卫生毒理学教研室;
【关键词】： 心肌细胞 成纤维细胞 新生小鼠 体外培养 共培养 细胞增殖
【基金】：国家自然科学基金(81473291;81402651) “重大新药创制”科技重大专项(2014ZX09J14106) 上海市公共卫生重点实验室建设计划(12GWZX0501)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 成纤维细胞生长因子1(fibroblast growth fac-tors1,FGF1)在细胞增殖和分化方面有重要作用[1,2]。目前,已有一些关于小鼠胚胎成纤维细胞与心肌细胞共培养的研究[3,4],这些研究大多是将成纤维细胞作为饲养层与心肌细胞进行直接共培养。哺乳动物心肌细胞在出生后一定时间内具有

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 李卫东;张晓刚;常静;蒋芳萍;;与心肌细胞共培养的小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞分化[J];基础医学与临床;2009年01期

2 刘炫;廖斌;;共培养诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的研究进展[J];西南军医;2013年02期

3 李琳;龙超良;汪海;;埃他卡林对心肌细胞损伤保护作用的药理学特征[J];中国药理学通报;2011年04期

4 甄一松;惠汝太;熊敬维;;心脏的再生性研究进展[J];遗传;2011年11期

5 张茜;金若敏;;细胞共培养技术的研究进展[J];中国药理学与毒理学杂志;2011年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张乃菊;陈天平;祝晓光;;乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞的原代培养[J];蚌埠医学院学报;2010年06期

2 王士珍;李雪甫;陈培;;胚胎干细胞的定向诱导分化及其应用前景[J];广东畜牧兽医科技;2012年05期

3 程阔菊;黄河;杜智勇;李洪;杨天德;;原代乳小鼠心肌细胞的分离培养及鉴定[J];重庆医学;2013年22期

4 彭琼乐;杨得志;赵浏阳;王黎阳;孙艳;柳满然;;人乳腺癌相关成纤维细胞对MDA-MB-231细胞的影响[J];第三军医大学学报;2013年23期

5 唐培培;张硕;相萍萍;黄艳;周学平;;一种新型多细胞共培养皿[J];中国临床药理学杂志;2014年02期

6 郝亚荣,李庚山,李建军;乳鼠心肌细胞培养[J];岭南心血管病杂志;2001年02期

7 王士珍;李雪甫;陈培;;胚胎干细胞的定向诱导分化及应用前景[J];科技视界;2012年23期

8 詹兴旺;姜艳;王文良;;细胞共培养在组织工程研究中的应用及价值[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年20期

9 颜晓静;张丽;李t，

本文编号：734950