Smad3调控成釉细胞Amelotin启动子转录活性的研究

发布时间：2017-08-29 01:35

  本文关键词：Smad3调控成釉细胞Amelotin启动子转录活性的研究

  更多相关文章： Smad Amelotin EMSA 双荧光素酶报告基因检测

【摘要】：目的:研究Smad3对Amelotin启动子转录活性的影响。方法:用基因克隆技术获得含有不同长度Amelotin启动子片段的荧光素酶报告基因载体,然后将其与Smad3瞬时转染小鼠成釉细胞,并用双荧光素酶报告基因检测其活性;生物学信息软件对人和小鼠的Amelotin基因启动子序列的同源性进行BLAST分析;凝胶迁移实验(EMSA)观察Smad3和Amelotin启动子特异性结合位点之间的相互作用;基因定点突变构建Smad3结合位点突变型Amelotin启动子,并用双荧光素酶报告基因检测系统分析Smad3对野生型和突变型Amelotin启动子转录活性的影响。结果:Smad3转染后,Amelotin启动子(-160~+196)转录活性明显增强(P0.05);将人与小鼠的Amelotin启动子序列(-160~+196)进行Blast序列比对,发现两序列在(-160~-1)具有很大的同源性;EMSA结果显示,Smad3与Amelotin启动子(-160~+196)的GTCTG有相互作用;将Amelotin启动子上Smad3结合位点特征性序列"GTCTG"突变为"CCCTG"后,Smad3对突变型Amelotin基因启动子的转录活性无显著影响(P0.05)。结论:转录因子Smad3可通过与Amelotin启动子特定序列结合而调控Amelotin的基因表达,从而在釉质发育过程中发挥重要作用。
【作者单位】： 滨州医学院附属医院口腔科;滨州医学院口腔医学院;
【关键词】： Smad Amelotin EMSA 双荧光素酶报告基因检测
【基金】：国家自然科学基金(81170927)
【分类号】：Q78;R329.2
【正文快照】： Smad蛋白家族作为细胞内的信号转导蛋白,在TGF-β超家族成员的信号转导中发挥重要作用。有研究显示,TGF-β/Smad3信号通路可通过Smad3与Amelotin启动子上的Smad3结合位点相互作用,进而调控成釉细胞Amelotin基因启动子的转录活性[1]。Smad3在釉质矿化过程中发挥着重要作用,Smad

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 刘晓影;高志芹;韩婷婷;官秀梅;高玉光;;人牙釉质蛋白Amelotin,Ameloblastin及Enamelin基因启动子的初步研究[J];潍坊医学院学报;2009年05期

【共引文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 易思健;BMP-2、P21、P53、AP-1在燃煤型氟斑牙仔鼠牙胚发育中的表达研究[D];遵义医学院;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 高玉光;李武修;孙言;韩建国;胡温庭;;小鼠Q9D3J8(釉成熟蛋白)基因在磨牙牙胚中的表达[J];口腔医学研究;2006年01期

2 周红英;孙学玲;何永云;刘晓影;赵娜;孙岩;梁广智;高玉光;;TGF-β1调控小鼠成釉细胞Amelotin基因表达的研究[J];口腔医学研究;2011年06期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 杨晓 ,孙彦洵 ,周江 ,黄培堂 ,黄翠芬 ,徐晓玲 ,李翠玲 ,GotayJessica ,陈林 ,邓初夏;Establishment of murine Smad5 double knockout ES cells and the studies on their properties[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2001年02期

2 程萱,徐晓玲,沈善祥,周江,邓初夏,杨晓;小鼠Smad3基因的克隆及其在小鼠组织中的表达[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年01期

3 苗竹林,王自能,程龙球,章韵;大鼠卵巢发育过程中Smad4的表达(英文)[J];第一军医大学学报;2005年02期

4 何欣蓉;霍艳英;胡迎春;李刚;刘敏丽;宋博强;米粲;吴德昌;;Smad4分子在ERK/MAPK信号转导通路中的作用[J];中国生物化学与分子生物学报;2006年04期

5 ;Genome-wide Analysis of Smad Targets Reveals the Role of BMP Signaling in Embryonic Stem Cell Fate Determination[J];生物物理学报;2009年S1期

6 唐文彬;凌光辉;刘伏友;;Smad锚着蛋白的结构和功能[J];国际病理科学与临床杂志;2009年06期

7 张子敬;柴亚楠;;Smad7蛋白的研究进展[J];北京农业;2011年09期

8 林海燕,王红梅,祝诚;转化生长因子-β信号传导的Smad通路[J];中国科学(C辑:生命科学);2003年02期

9 霍艳英,李刚,王莹,张开泰,何欣蓉,刘敏丽,项晓琼,胡迎春,吴德昌;Smad7基因对胞外信号调节激酶磷酸化水平的调控[J];生物技术通讯;2005年03期

10 孙琰,叶棋浓;Smad4蛋白的研究进展[J];生物技术通讯;2005年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 ;Function of TGF-β/Smad4 Signaling in the Maintenance of Tissue Homeostasis[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年

2 ;MH1 Domain of SMAD4 Binds N-terminal Residues of the Homeodomain of Hoxc9[A];第十五届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2008年

3 Juan Li;Jun Wang;Zhi-he Zhao;;Compressive Stress Relayed Chondrogenic Differentiation Through Smad-dependent and Smad-independent Pathways[A];第十届全国生物力学学术会议暨第十二届全国生物流变学学术会议论文摘要汇编[C];2012年

4 孙彦洵;周江;吕雅歆;杨晓;;Smad5双等位基因剔除导致小鼠胚胎干细胞体外定向分化的肌细胞凋亡[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年

5 霍艳英;王莹;张开泰;王莉;徐勤枝;项晓琼;胡迎春;李刚;米粲;吴德昌;;Smad7基因沉默对细胞增殖的影响[A];第七届全军防原医学专业委员会第五届中国毒理学会放射毒理专业委员会学术会议论文汇编[C];2004年

6 霍艳英;王莹;张开泰;王莉;项晓琼;胡迎春;徐勤枝;李刚;米粲;吴德昌;;Smad7基因沉默对细胞增殖的影响[A];中国药理学会毒理专业委员会第十次学术会议论文摘要汇编[C];2004年

7 陈澄;陈卉;孙建平;Pablo Bringas Jr．;陈誉华;David Warburton;史伟;;Smad1的表达及其在肺分枝化形态发生中功能的分析[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年

8 杨晓;;Function of Smad4 in maintaining normal organization of growth plate and postnatal bone homeostasis[A];中国遗传学会七届二次青年研讨会论文汇编[C];2006年

9 Jing Zhou;李芷懿;Jeng-Jiann Chiu;;Force-specific activation of Smad1/5 regulates vascular endothelial cell cycle and progression in response to disturbed flow[A];2012年中国科协海峡两岸青年科学家学术活动月——第九届海峡两岸细胞生物学学术研讨会论文集[C];2012年

10 毛春明;杨晓;张莉;孙彦洵;侯宁;吕娅歆;黄翠芬;;Smad3调节小鼠胚胎成纤维细胞的收缩能力[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 孙彦洵;Smad5基因在小鼠胚胎干细胞增殖、分化及凋亡中的功能与机制[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

2 贾顺姬;Smad2/3在斑马鱼胚胎早期发育中的作用[D];清华大学;2008年

3 王乐;CHIP负调控Smad1/5蛋白的分子机理[D];清华大学;2011年

4 张素平;Smad7通过干扰Smad-DNA复合物的形成抑制TGF-β信号[D];清华大学;2006年

5 张继帅;利用条件基因剔除技术研究Smad4基因在软骨内成骨过程中的功能[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

6 郑嵘;利用RNA干涉技术研究Smad2和Smad3在鼠成纤维细胞TGF-β信号通路中的不同作用[D];华中农业大学;2008年

7 陈澄;BMP4通路下游信号分子Smad1在肺发育中作用的研究[D];中国医科大学;2005年

8 李丽莉;BMP-Smad信号通路的调节及其在成骨分化中的作用[D];山东大学;2013年

9 梁俊波;与睾丸高表达蛋白质RNF138相互作用的蛋白激酶NLK的功能研究和睾丸特异表达蛋白质RSA-14-44的功能研究[D];北京协和医学院;2010年

10 孙涛;TGFβ信号调控及配体对雌激素受体的激活研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 廉坤;深低温停循环对大鼠大脑皮层Smad2和Smad4表达影响的实验研究[D];昆明医学院;2010年

2 程译文;pRB与Smad3的相互作用及结构生物学研究[D];浙江大学;2013年

3 朱翠;与Smad4相互作用的新蛋白HP的鉴定及特性研究[D];四川农业大学;2008年

4 徐瑛蕾;SF-1和Smad3相互作用促进小鼠颗粒细胞中Cyp19a1的表达[D];中国科学技术大学;2011年

5 闫永平;TGF-β1及其信号传导分子Smad2和Smad4在羊驼睾丸的表达与定位[D];山西农业大学;2005年

6 贾玉馨;GATA2与Smad4相互作用负调控TGFβ信号通路[D];天津大学;2009年

7 高磊;APC激活Asef的GEF活性机理研究及Smad7 N端结构域的纯化与结晶研究[D];上海交通大学;2012年

8 李建伟;文昌鱼发育相关基因Smad、Tmp21表达及文昌鱼斑马鱼Rab23同源基因的比较研究[D];山东大学;2007年

9 黄思斯;泛素连接酶Smurf1不同剪接异构体的鉴定及功能研究[D];中南大学;2012年

10 胡静;大鼠睾丸Smad1,Smad2,Smad4和Smad5蛋白的表达与发育变化研究[D];第四军医大学;2001年

，

本文编号：750658