烟曲霉Af293 chsD基因缺失突变株的构建

发布时间：2017-09-03 00:12

  本文关键词：烟曲霉Af293 chsD基因缺失突变株的构建

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【摘要】：目的构建Af293 chs D缺失突变株,并对chs D的功能进行初步的研究。方法 PCR扩增chs D两侧部分序列并连接至p PK2质粒的潮霉素表达盒两端,从而构建重组质粒p PK2/chs D-(L+R)。酶切p PK2/chs D-(L+R)并胶回收含chs D左侧、hph表达盒及chs D右侧的片段,连接至p DHt/SK而构建二元质粒p DHt/chs D::hph。经ATMT方法将p DHt/chs D::hph转化至Af293,经潮霉素抗性筛选从而获得烟曲霉△chs D突变株,并测量Af293,△chs D突变株生长直径及扫描电镜下观察分生孢子形态。结果经PCR初步鉴定,筛选出的突变株中,其染色体中的chs D序列已被hph置换,初步形态研究表明,△chs D突变株的生长速度显著低于Af293野生型,且分生孢子凹陷呈干瘪状。结论成功获得Af293△chs D突变株。chs D基因功能初步研究表明,chs D可能与烟曲霉的生长相关。
【作者单位】： 南方医科大学附属深圳市龙华新区人民医院皮肤科;兰州军区兰州总医院皮肤科;
【关键词】： 烟曲霉 chsD 基因置换 突变株
【基金】：广东省医学科研基金项目(B2013362)
【分类号】：R379
【正文快照】： 烟曲霉(Aspergillus fumigatus)普遍存在于环境中,是引起过敏性支气管肺曲霉病、曲霉球和侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)的空气播散性条件致病真菌。目前,由于癌症、器官移植、艾滋病等原因造成免疫功能抑制患者的逐渐增多,侵袭性曲霉病的发病率也逐年增加[1]。虽然

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

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【共引文献】

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1 程娜;晓军;赵民安;张文明;姚大年;;农杆菌介导遗传转化宿主的研究进展[J];安徽农业科学;2006年24期

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本文编号：781704