抗人血红蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

发布时间：2017-09-03 10:15

  本文关键词：抗人血红蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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【摘要】：目的运用杂交瘤技术制备抗血红蛋白(hemoglobin,Hb)单克隆抗体,为进一步探讨Hb在帕金森病中的发病机制及早期诊断中的意义奠定基础。方法用重组人Hb作为抗原免疫Balb/c小鼠,并将其脾细胞与同系骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤,经3次有限稀释法及酶联免疫吸附试验法筛选获得抗人Hb单克隆抗体杂交瘤株5B1。腹腔注射于免疫抑制Balb/c小鼠产生腹水,并利用Dot blotting、酶联免疫吸附实验,免疫共沉淀、Western blotting法及免疫组织化学染色法进一步测定抗体效价,获得一特异性抗Hb单克隆抗体。结果成功制备出1株高亲和力、特异性好的抗Hb单克隆抗体。结论制备的单克隆抗体对Hb具有特异性(包括人血、猴及小鼠),为进一步研究Hb在帕金森病(Parkinson's disease,PD)中的作用提供了有力的特异性工具。
【作者单位】： 首都医科大学宣武医院神经生物学研究室;帕金森病研究北京重点实验室;桂林医学院解剖学教研室;北京脑重大疾病研究院帕金森病研究所;
【关键词】： 血红蛋白 单克隆抗体 帕金森病
【基金】：国家重点基础研究发展计划(2011CB504101) 国家自然科学基金(81071014,81371200,81401042) 国家科技支撑计划课题(2012BAI10B03) 北京市自然科学基金(7122035) 首都卫生发展科研专项课题(2011-4001-01)~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是继阿尔茨海默病之后的第二大神经系统退行性疾病。目前基于运动症状的诊断已是疾病晚期,此时PD患者中脑黑质多巴胺能神经元蜕变率已经达到70%以上[1]。然而,以路易体病变为主要特征的PD病理变化早在黑质多巴胺能神经元病变之前就已出现于嗅

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