鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株的构建及生物学特性

发布时间：2017-09-04 11:34

  本文关键词：鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株的构建及生物学特性

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【摘要】：目的:为了研制更加安全的鼠伤寒沙门菌弱毒株,本研究构建了鼠伤寒沙门菌SL1344Δsip B基因缺失突变株。方法:首先构建含缺失585 bp sipB基因的重组自杀性质粒PREΔsipB,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选出SL1344的sip B缺失株。结果:PCR及测序结果表明SL1344ΔsipB构建成功。进一步生物学特性研究表明,缺失株SL1344ΔsipB保留了亲本菌株SL1344的血清型1,4,5,12:i:1,2,且能够稳定遗传缺失585 bp的sipB基因,生长速度没有发生明显改变;但是,与亲本株SL1344相比,其毒力发生明显改变,缺失株SL1344ΔsipB口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为1.70×108CFU,毒力较亲本株SL1344降低至1.4%,免疫保护效力实验显示,对6周龄BALB/c小鼠免疫后第17天,鼠伤寒沙门菌野生株攻毒有50%的保护率。在给小鼠免疫后第14天血清抗体IgG达到最高。结论:结果表明,SL1344ΔsipB基因缺失株构建成功,遗传稳定,毒力明显降低,且具有较好的免疫原性,为研究鼠伤寒沙门菌sipB基因与其致病力之间的关系提供了方法,并为研制安全有效的沙门菌疫苗弱毒株奠定了基础。
【作者单位】： 河南省动物疫病与公共安全院士工作站/河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室;
【关键词】： 鼠伤寒沙门菌SL sipB基因 缺失株 生物学特性
【基金】：河南省科技攻关(112102110019) 河南科技大学博士启动基金项目(09001580) 河南科技大学青年科学基金项目(13000820)资助
【分类号】：R378.22
【正文快照】： 鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium,ST)属于肠道致病菌,也是重要的人类食物源性病原体,对于公共卫生方面,该菌具有重要的意义[1]。沙门菌的致病机制与Ⅲ型分泌系统(T3SS)有关,由SPI-1和SPI-2两个毒力岛编码,负责细菌效应蛋白的分泌和转运,通过改变宿主细胞的生理机能来促进

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本文编号：791304