TRPV1对内皮细胞增殖、迁移能力的影响及相关机制

发布时间：2017-10-20 01:07

  本文关键词：TRPV1对内皮细胞增殖、迁移能力的影响及相关机制

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【摘要】：目的:随着社会经济的稳步发展人民生活条件在近年来也不断得到改善,但是随之而来的高血压、糖尿病、冠心病等代谢性疾病的发生率、死亡率却逐年攀升,其伴发的脑卒中、心力衰竭、心肌梗塞、肾功能损害以及外周、心脏和中枢动脉血管病变严重威胁人类健康。在血管的解剖结构中内皮细胞构成血管内壁的屏障,其形态、功能对血管疾病有着非常重要的影响,且内皮细胞的损伤已成为血管疾病的启动因素。所以,对内皮细胞功能极其影响机制的研究在心血管等代谢性疾病的防治方面体现出极其深远社会意义。瞬时受体电位通道-香草酸亚型1(Transient Receptor Potential Vanilloid 1,TRPV1)可以被我们常用的食品红辣椒中的辣椒素(Capsaicin)激活,既往大量的研究表明,TRPV1广泛分布于神经系统中,起也分布在内皮细胞中,TRPV1激活后可引起钙离子向细胞内流,使细胞内钙离子(Intracellular Calcium,[Ca2+]i)浓度升高,长期激活TRPV1可以使内皮细胞舒张,从而改善内皮细胞和血管功能;TRPV1与蛋白激酶A(Protein Kinase A,PKA)、内皮型一氧化氮合酶(Endothelial Nitric-oxide Synthase,e NOS)信号通路相关,且PKA细胞信号传导通路与细胞增殖通路密切联系;而磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B信号通路,即PI3K/AKT信号通路是经典的增殖相关细胞信号传递通路。综上,我们推测,TRPV1可调控PI3K/AKT/e NOS通路信号转导蛋白的表达,促进内皮细胞增殖、迁移,改善内皮细胞功能、预防血管疾病。材料和方法:实验材料:整个研究由细胞实验构成。细胞实验以培养人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC)为研究对象。实验分组:分为对照组(Control)、辣椒素组(Capsaicin)、辣椒卓平组(Capsazepine)、辣椒卓平+辣椒素组(Capsazepine+Capsaicin)、LY294002组(LY294002)、LY294002+辣椒素组(LY294002+Capsaicin)、L-NAME组(L-NAME)、L-NAME+辣椒素组(L-NAME+Capsacin)。1、用免疫荧光染色法观察TRPV1在人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC)的表达。2、应用Transewell实验检测各组干预条件干预后人脐静脉内皮细胞Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC)的迁移能力。3、用CCK8试剂盒检测各组干预条件干预后人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC)的增殖能力。4、用蛋白免疫印迹法检测各组干预条件干预后人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC)增殖相关信号通路蛋白(AKT、p-AKT、e NOS、p-e NOS)的表达。结果:1、TRPV1在人静脉内皮细胞(HUVEC)中有表达。2、辣椒素(Capsaicin)激活TRPV1后人静脉内皮细胞(HUVEC)迁移能力增加;辣椒卓平(Capsazepine)、L-NAME和LY294002干预处理后人静脉内皮细胞(HUVEC)迁移能力下降。3、辣椒素(Capsaicin)激活TRPV1后人静脉内皮细胞(HUVEC)增殖能力增加;辣椒卓平(Capsazepine)、L-NAME和LY294002干预处理后人静脉内皮细胞(HUVEC)增殖能力下降。4、辣椒素(Capsaicin)刺激可明显上调人静脉内皮细胞(HUVEC)phospho-AKT、phospho-e NOS蛋白的表达;用PI3K/AKT通道受体拮抗剂LY294002干预HUVEC,或者用e NOS抑制剂L-NAME干预后;人静脉内皮细胞(HUVEC)phospho-AKT、phospho-e NOS蛋白的表达明显降低;用PI3K/AKT通道受体拮抗剂LY294002干预HUVEC,或者用e NOS抑制剂L-NAME干预后再用辣椒素(Capsaicin)刺激HUVEC,phospho-AKT、phospho-e NOS蛋白表达较单纯辣椒素刺激组相比明显下降。结论:1、TRPV1在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中有表达。2、TRPV1激活后,人静脉内皮细胞(HUVEC)迁移、增殖能力增加。3、TRPV1通过激活PI3K/AKT/e NOS信号通路促进内皮细胞迁移、增殖,使内皮细胞修复能力增加,从而改善内皮细胞及血管功能,预防血管疾病。
【关键词】：瞬时受体电位通道香草酸亚型1 人脐静脉内皮细胞 磷脂酰肌醇-3-羟激酶、蛋白激酶B、内皮型一氧化氮合酶
【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R54
【目录】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 第一部分TRPV1 对内皮细胞增殖、迁移能力的影响12-31
• 材料与方法12-19
• 结果19-23
• 讨论23-25
• 小结25-26
• 参考文献26-31
• 第二部分TRPV1 激活对PI3K/AKT/e NOS信号通路的影响31-46
• 材料与方法31-41
• 结果41-43
• 讨论43-44
• 小结44-45
• 参考文献45-46
• 全文结论46-47
• 英文缩略词对照表47-49
• 致谢49-50
• TRPV通路和血管功能相关研究研究 综述50-69
• 参考文献61-69

【共引文献】

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6 刘润;周农;;老年男性缺血性脑卒中患者炎性因子血清学水平变化与预后的关系[J];中国全科医学;2014年07期

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1 吴艳艳;反复觉醒对心血管系统的影响：探究OSAHS患者心血管并发症的发生机制[D];北京协和医学院;2013年

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3 吴刚强;从Ca~(2+)-CaN-NFAT_3信号通路探讨益心泰对慢性心力衰竭家兔心肌重构的作用[D];湖南中医药大学;2014年

4 胡婕伦;大粒车前子多糖体内外消化与酵解特征体系构建及其促进肠道健康的作用[D];南昌大学;2014年

5 王娜;瑞舒伐他汀对心血管慢性间歇性缺氧损害的影响研究[D];郑州大学;2014年

6 范晓艳;蒲参胶囊对高甘油三酯血症的血管保护作用研究[D];山东中医药大学;2014年

7 王铭裕;C-反应蛋白结构/功能的氧还调控机制[D];兰州大学;2012年

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1 薛慧良;不同降糖方案对糖尿病肾病患者血管内皮功能的影响[D];遵义医学院;2013年

2 吴晶莹;尿酸与原发性高血压患者非杓型血压形态的关系[D];福建医科大学;2013年

3 王雪春;血清白细胞介素17与高血压前期的相关性探讨[D];天津医科大学;2013年

4 杨鹏;鲁西南地区青年缺血性脑卒中脑血管狭窄分布特征[D];天津医科大学;2013年

5 马_g靓;应用血管回声跟踪技术评价桥本氏病患者的颈动脉弹性[D];昆明医科大学;2013年

6 李宏宇;宁夏城市居民代谢综合征相关因素及筛检指标的研究[D];宁夏医科大学;2013年

7 王浩华;甲状腺激素对内皮细胞凋亡的影响及OPG干预研究[D];南方医科大学;2013年

8 刘润;男性缺血性脑卒中患者E2，，IL-6，hs-CRP血清学水平变化与预后的研究[D];安徽医科大学;2013年

9 李哲;影响透析患者血管内皮功能相关因素的探讨[D];河北医科大学;2014年

10 龙敬宁;盐酸曲美他嗪与阿托伐他汀钙联用对原发性高血压患者内皮功能的影响[D];河北医科大学;2014年

本文编号：1064353