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PPARγ激动剂对RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量及ABCG1、LXRα表达的影响

发布时间:2017-10-24 00:17

  本文关键词:PPARγ激动剂对RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量及ABCG1、LXRα表达的影响


  更多相关文章: 吡格列酮 过氧化物酶受体γ激动剂 泡沫细胞 胆固醇含量 肝X受体α 三磷酸腺苷转运体G1


【摘要】:目的:通过体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,诱导分化建立泡沫细胞模型,然后测定PPARγ激动剂盐酸吡格列酮(pioglitazone hydrochloride,PG)对泡沫细胞内胆固醇含量及ABCG1、LXRα表达的影响,旨在初步探究PG对泡沫细胞内胆固醇含量的调控机制。方法:1.体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,再用50mg/L ox-LDL孵育48h,最后以油红O染色并在光镜下观察细胞形态及变化。2.以不同浓度的PG(对照组0μmol/L、实验组5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用泡沫细胞24h后,酶比色法测定泡沫细胞内胆固醇酯(Cholesterol Ester,CE)的含量;以30μmol/L的PG作用泡沫细胞不同时间(对照组Oh、实验组6h、12h、24h、48h)后,酶比色法测定泡沫细胞内CE的含量。3.将诱导分化好的RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞,给予不同浓度的PG(对照组0μmol/L、实验组5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用24h后,RT-PCR和Western blot分别测定ABCG1、LXRα的基因及蛋白表达水平。结果:(1)体外培养的RAW264.7小鼠巨噬细胞半贴壁生长,主要呈类圆形和不规则多边形,细胞体积较小,含1-2个核,有伪足伸出,经50mg/L ox-LDL孵育48h后,细胞体积显著变大,油红O染色胞质内可见大量红染脂滴。(2)与对照组相比,不同浓度的PG干预RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞24h后,细胞内的CE含量均显著减少,差异有统计学意义(P0.01);与对照组相比,30μmol/LPG作用RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞0h、6h、12h、24h、48h后,细胞内的CE含量均显著减少,差异有统计学意义(P0.01)。(3)与对照组相比,不同浓度PG组巨噬细胞ABCG1、LXRα的m RNA及蛋白的水平呈浓度依赖性增高,差异有统计学意义(P0.01)。结论:1.PPARγ激动剂可减少RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量,并呈浓度和时间依赖性。2.PPARγ激动剂可呈浓度依赖性增加小鼠RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞内ABCG1、LXRα的m RNA及蛋白表达。3.PPARγ激动剂减少泡沫细胞内胆固醇酯的含量可能是通过上调ABCG1、LXRα的表达来实现的,此机制介导的胆固醇流出将成为改善AS的主要途径之一。
【关键词】:吡格列酮 过氧化物酶受体γ激动剂 泡沫细胞 胆固醇含量 肝X受体α 三磷酸腺苷转运体G1
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R543
【目录】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 常用缩写词中英文对照表9-10
  • 前言10-12
  • 1 材料和方法12-21
  • 1.1 材料和仪器12-13
  • 1.2 方法13-21
  • 2 结果21-27
  • 2.1 泡沫细胞模型的建立21
  • 2.2 盐酸吡格列酮对巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇含量的影响21-23
  • 2.3 盐酸吡格列酮对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCG1、LXRΑMRNA的表达23-24
  • 2.4 盐酸吡格列酮对巨噬细胞源性泡沫细胞 ABCG1 LXRα 蛋白的表达24-27
  • 3 讨论27-29
  • 4 结论29-30
  • 参考文献30-33
  • 综述33-41
  • 参考文献38-41
  • 致谢41-42
  • 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果42-43
  • 个人简介43

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