缺氧诱导因子-1α与缺氧复氧条件下NLRP3炎症小体激活的关系

发布时间：2017-11-26 07:09

  本文关键词：缺氧诱导因子-1α与缺氧复氧条件下NLRP3炎症小体激活的关系

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【摘要】：目的:研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)与缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)条件下人脐静脉内皮细胞NLRP3炎症小体激活的关系。方法:(1)建立人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧模型;(2)采用Western Blot分别检测缺氧和复氧不同时间后HIF-1α与NLRP3的表达情况,选出蛋白表达最高的缺氧和复氧时间点;(3)在选取的缺氧复氧时间点分两部分进行实验。第一部分:①正常组;②H/R组;③H/R+HIF-1α抑制剂YC-1组;④H/R+HIF-1α激动剂DMOG组;第二部分:①正常组;②H/R组;③H/R+si RNA阴性对照组;④H/R+HIF-1αsi RNA组;⑤H/R+HIF-1α空载质粒组;⑥H/R+HIF-1α过表达质粒组;(4)采用Western Blot和荧光定量PCR检测各组HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1的蛋白和m RN A表达情况。ELISA检测各组细胞因子IL-18的表达量。结果:(1)在缺氧复氧条件下,人脐静脉内皮细胞HIF-1α、NLRP3蛋白表达较正常组明显升高,在缺氧16h和复氧8h两者表达最为显著。(2)加入YC-1预处理的缺氧复氧组,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达较单纯缺氧复氧组明显降低(P0.05),HIF-1αm RNA水平无变化(P0.05),NLRP3、ASC、caspase-1 m RNA表达较缺氧复氧组明显降低(P0.05),IL-18分泌量较缺氧复氧组明显减少(P0.05);加入DMOG预处理的缺氧复氧组,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白及m RNA表达较缺氧复氧组均明显升高(P0.05),且IL-18分泌量较单纯缺氧复氧组明显增多(P0.05)。(3)沉默HIF-1α后进行缺氧复氧处理,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白及m RNA表达较缺氧复氧组均明显降低(P0.05),IL-18分泌量较缺氧复氧组明显减少(P0.05);过表达HIF-1α后进行缺氧复氧处理,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白及m RNA表达较缺氧复氧组均明显升高(P0.05),IL-18分泌量较缺氧复氧组明显增多(P0.05)。结论:(1)缺氧复氧条件下,人脐静脉内皮细胞HIF-1α以及NLRP3炎症小体表达明显升高。(2)缺氧复氧条件下抑制HIF-1α表达,NLRP3炎症小体表达明显降低。(3)缺氧复氧条件下诱导HIF-1α表达,NLRP3炎症小体表达明显升高。(4)HIF-1α参与人脐静脉内皮细胞缺氧复氧过程中NLRP3炎症小体的激活。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.4

【参考文献】

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1 陈伟伟;高润霖;刘力生;朱曼璐;王文;王拥军;吴兆苏;胡盛寿;;中国心血管病报告2013概要[J];中国循环杂志;2014年07期

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本文编号：1228950