尾加压素Ⅱ在糖尿病心肌纤维化中的作用及机制研究

发布时间：2018-03-15 10:20

  本文选题：尾加压素Ⅱ　切入点：糖尿病性心肌病　出处：《青岛大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的研究高糖刺激对心肌成纤维细胞中尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,UⅡ)及其受体(UT)表达的影响。观察UⅡ系统对心肌纤维化的影响,及阻断UⅡ系统后,高糖刺激对心肌纤维化的影响变化。并探讨UⅡ在糖尿病性心肌病发病过程中的作用及分子机制。方法取Wistar大鼠出生1-3天乳鼠的心肌成纤维细胞,于体外原代培养并传代,取第三代心肌成纤维细胞,随机分为低糖组(5mmol/L葡萄糖)、高糖组(25mmol/L葡萄糖)、高渗组(5mmol/L葡萄糖+20mmol/L甘露糖),应用倒置相差显微镜观察不同组间的细胞变化,用免疫印迹法检测三组细胞中UⅡ、UT的表达情况。为研究阻断UⅡ系统对心肌成纤维细胞的影响,进一步将各组分为两个亚组:对照组和UⅡ受体拮抗剂(urantide)处理组,即高糖组、高糖+urantide组、低糖组、低糖+urantide组、高渗组和高渗+urantide组,并用免疫印迹法、RT-PCR法检测各组细胞中TGF-β1、I型胶原及Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果培养24h后,用倒置相差显微镜观察各组心肌成纤维细胞,发现高糖组心肌成纤维细胞较低糖对照组及高渗对照组增殖数目较多,相邻细胞之间连接比较紧密,且存在部分细胞交叉重叠现象。高糖组心肌成纤维细胞中UⅡ及其受体(UT)蛋白表达量较低糖组和高渗组显著增加(P0.05)。与对照组、高渗组相比,高糖组TGF-β1、I型胶原和ⅡI型胶原的蛋白及mRNA表达量显著增高(P0.05)。预处理urantide后,高糖+urantide组较高糖组TGF-β1、I型胶原和ⅡI型胶原蛋白及mRNA表达量明显下降(P0.05)。结论Wistar大鼠心肌成纤维细胞中存在UⅡ及其受体UT表达,高糖刺激可以促进乳鼠心肌成纤维细胞中UⅡ及UT的表达增加。高糖刺激可以加快心肌成纤维细胞的增殖。高糖刺激可以促进乳鼠心肌成纤维细胞中心肌纤维化相关产物,即转化生长因子-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达增加,且此过程可被urantide抑制。提示UⅡ通过其受体UT及TGF-β1信号通路加速糖尿病心肌纤维化进程,UⅡ/UT系统可能是糖尿病性心肌病时心肌纤维化进展得重要机制之一,该系统或将成为治疗糖尿病性心肌病的新的靶点之一。
[Abstract]:Objective to study the effects of high glucose stimulation on the expression of Urotensin 鈪，

本文编号：1615601