水溶性蜂胶对高盐饮食大鼠心血管功能的作用及其影响机制

发布时间：2018-10-30 12:59

【摘要】：目的:通过高盐诱导复制高血压大鼠模型,观察水溶性蜂胶对其心血管功能的作用及其可能机制。方法:SD雄性大鼠,高盐饮食(含4%Na Cl饲料)喂养10周,与正常对照组大鼠(NC组,普通饲料,n=10)相比较,每天相同时间点无创检测大鼠尾动脉血压,高盐诱导高血压大鼠模型成功后,随机分为5组(n=10):高盐饮食高血压组(SH组)、高盐饮食高血压组+蜂胶低浓度组(SH+WSP-L组,50mg/Kg)、高盐饮食高血压组+蜂胶中浓度组(SH+WSP-M组,100mg/Kg)、高盐饮食高血压组+蜂胶高浓度组(SH+WSP-H组,200mg/Kg)、高盐饮食高血压组+卡托普利组(SH+CAP组,50mg/Kg)。从第11周开始对各组大鼠进行药物干预:SH+WSP-L组、SH+WSP-M组、SH+WSP-H组和SH+CAP组给予相应浓度药物灌胃,SH组和NC组给予等量蒸馏水,1次/日,每天相同时间点无创检测大鼠尾动脉血压,连续四周。生物信号采集系统检测各组大鼠心功能指标(HR、LVDP、±dp/dtmax),同时检测各组大鼠胸主动脉环张力;留取各组大鼠血浆、心脏、肾脏及胸主动脉环,检测白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在各组大鼠血浆中的含量,检测血浆中一氧化氮(NO)和动脉匀浆中内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的量,以及动脉匀浆中过氧化氢(H2O2)含量及过氧化氢酶(CAT)活性;同时观察各组大鼠心、肾、血管的形态学变化;分别采用免疫印迹法(WB)和聚合酶链式反应(PCR)检测检测各组大鼠心肌、肾脏以及血管组织中Nox2、Nox4的表达情况。结果:1.高盐诱导大鼠血压变化情况与NC组相比,SH组大鼠在第3~10周血压显著升高(P0.05或P0.01),在给药期间SH组大鼠血压仍持续升高(P0.01);SH+WSP-M及SH+WSP-H组大鼠血压随给药浓度增加而显著降低,而SH+WSP-L组大鼠血压降低无统计学意义;与SH组相比,SH+WSP-M组、SH+WSP-H组、SH+CAP组大鼠血压明显下降(P0.05或P0.01)。2.各组大鼠心功能变化情况与NC组相比,SH组、SH+WSP-L组及SH+WSP-M组大鼠心脏做功(LVDP×HR)、±dp/dtmax显著低下(P0.05或P0.01),而SH+WSP-H和SH+CAP组差异无显著性(P0.05);同SH组相比,SH+WSP-M组、SH+WSP-H组和SH+CAP组大鼠心脏做功(LVDP×HR)、±dp/dtmax显著恢复(P0.05或P0.01)而SH+WSP-L组变化无显著性(P0.05)。3.各组大鼠胸主动脉环张力变化(1)Phe对大鼠胸主动脉环收缩率改变SH组、SH+WSP-L组在Phe浓度为(10-8~10-5)mol/L时、SH+WSP-M组在Phe浓度为(10-8~10-6)mol/L时,与NC组相比,收缩率升高有显著性(P0.05或P0.01);SH+WSP-M组但在Phe浓度10-5mol/L时、SH+WSP-H组和SH+CAP组在Phe浓度为(10-8~10-5)mol/L时无显著差异性(P0.05)。与SH组进行比较,SH+WSP-L组在Phe(10-8~10-5)mol/L浓度下收缩率下降,但差异无显著性(P0.05),而SH+WSP-M组在Phe浓度为(10-8~10-7)mol/L时收缩率差异也不显著(P0.05);SH+WSP-M组在Phe(10-6~10-5)mol/L浓度时、SH+WSP-H组和SH+CAP组在Phe(10-8~10-5)mol/L浓度时收缩率均显著下降(P0.05或P0.01)。(2)ACh对大鼠胸主动脉环舒张率改变与NC组相比,SH组、SH+WSP-L组在ACh浓度为(10-8~10-5)mol/L时、SH+WSP-M组在浓度为(10-8~10-6)mol/L时,舒张率明显降低(P0.05或P0.01);SH+WSP-M组在ACh浓度10-5 mol/L时、SH+WSP-H组和SH+CAP组在浓度为(10-8~10-5)mol/L时差异无显著性(P0.05)。SH+WSP-L组在ACh浓度为(10-8~10-5)mol/L时、SH+WSP-M组在浓度为(10-8~10-6)mol/L时的舒张率与SH组相比,差异无显著性(P0.05);SH+WSP-M组在ACh浓度为10-5 mol/L时舒张率显著升高(P0.05),SH+WSP-H组和SH+CAP组在ACh为(10-8~10-5)mol/L时舒张率也升高(P0.05或P0.01)。(3)L-NAME孵育后ACh对大鼠胸主动脉环舒张率改变ACh浓度为(10-8~10-5)mol/L时,SH组、SH+WSP-L组、SH+WSP-M组、SH+WSP-H组、SH+CAP组与NC组相比,舒张率无明显改变(P0.05)。4.生化指标检测(1)血浆中NO、血管匀浆中e NOS含量同NC组相比,SH组、SH+WSP-L组和SH+WSP-M组血浆中NO含量及血管匀浆中e NOS含量均明显下降(P0.05或P0.01),而SH+WSP-H组和SH+CAP组差异不显著(P0.05)。(2)血管匀浆中H2O2含量、CAT活性与NC组相比,SH组、SH+WSP-L组和SH+WSP-M组血管匀浆中的H2O2含量明显升高(P0.05或P0.01),CAT活性却明显下降(P0.05或P0.01),而SH+WSP-H组和SH+CAP组的变化差异无统计学意义(P0.05)。(3)血浆中IL-6与TNF-α的含量比较与NC组相比,SH组、SH+WSP-L组和SH+WSP-M组血浆中IL-6和TNF-α的含量差异显著升高(P0.05或P0.01),而SH+WSP-H组和SH+CAP组差异无统计学意义(P0.05);同SH组相比,SH+WSP-M组、SH+WSP-H组和SH+CAP组血浆中IL-6和和TNF-α含量显著降低(P0.05或P0.01)。(4)血管组织中ROS含量与NC组相比,SH组、SH+WSP-L组和SH+WSP-M组血管组织中ROS含量明显增多(P0.05),SH+WSP-H组和SH+CAP组差异无显著性(P0.05);与SH组相比,SH+WSP-L组、SH+WSP-M组、SH+WSP-H组和SH+CAP组血管组织中ROS含量明显减少(P0.05或P0.01)。5.心脏、肾脏、血管组织的形态学改变情况HE染色结果显示,NC组大鼠心肌细胞排列整齐,形态正常;主动脉内皮细胞形态均匀扁平且呈紧密排列,中膜层细胞呈现出整齐规则的排列且血管壁厚度均匀;大鼠肾小体形态结构正常,肾脏小血管未见病变。SH组心肌细胞可见明显的心肌纤维断裂并间隙增宽的现象;大鼠的主动脉,可见的内膜损伤,血管壁增厚且细胞排列及形态改变;而肾脏组织结构中,也出现小动脉玻璃样变性,肾小体萎缩的现象。与SH组相比,SH+WSP-L组、SH+WSP-M组、SH+WSP-H组形态学的病理改变,随给药浓度的增加有逐渐减轻的趋势;SH+CAP组病理改变也减轻。6.心脏、肾脏、血管中Nox2和Nox4的表达情况与NC组的WB和PCR结果相比,SH组、SH+WSP-L组和SH+WSP-M组三组WB、PCR分析后显示出Nox2、Nox4的表达明显被上调(P0.05或P0.01),SH+WSP-H组和SH+CAP组比之NC组则差异不显著(P0.05);比之SH组WB、PCR结果,分析SH+WSP-L组和SH+WSP-M组Nox2、Nox4的表达结果发现差异不显著(P0.05),SH+WSP-H组和SH+CAP组两者的表达均明显减少(P0.05或P0.01)。结论:高盐饮食诱导高血压大鼠模型复制成功;水溶性蜂胶对高血压大鼠的血压有明显降低效应,对其心血管功能亦有明显的改善作用,可能是通过抗氧化、抗炎以及改善高血压大鼠的内皮功能而实现的。
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【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R544.1

【参考文献】