HDAC3在H9C2细胞缺血再灌注损伤中的表达及干预机制

发布时间：2019-07-11 14:16

【摘要】：目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在大鼠H9C2心肌细胞缺血再灌注损伤中的表达及其部分机制研究。方法将H9C2细胞分为以下3组:正常对照组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+曲古霉素(TSA)组。MTT法检测细胞增殖活力;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;Western blot法测定细胞内HDAC3蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测HDAC3 mRNA表达情况。结果 MTT法检测结果显示:与正常对照组比较,I/R组、I/R+TSA组抑制率均显著提高,并且I/R组显著高于I/R+TSA组;I/R组LDH活性明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组;Western blot检测显示:I/R组、I/R+TSA组HDAC3的表达明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组;实时荧光定量PCR检测I/R组、I/R+TSA组HDAC3的mRNA表达明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组。结论HDAC3表达上调可能在H9C2细胞缺血再灌注损伤中起到重要作用。
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图片说明： x±s表示，组间比较采取两样本t检验，多组均数比较应采用方差分析，检验水准P＜0.05差异有统计学意义。2结果2．1MTT结果显示与正常对照组相比，I/Ｒ组细胞增殖活性明显降低(t=4.38，P＜0.05)，I/Ｒ+TSA组增殖活性明显低于正常对照组(t=3.84，P＜0.05)，但高于I/Ｒ组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见图1。2．2LDH含量检测与正常对照组(24.52±2.34)相比，I/Ｒ组(75.13±5.22)细胞培养液LDH含量明显增高(t=6.35，P＜0.05)，I/Ｒ+TSA组明显低于I/Ｒ组(53.23±3.86)(t=3.76，P＜0.05)，差异有统计学意义。见图2。图1MTT法检测细胞活性1:正常对照组;2:I/Ｒ组;3:I/Ｒ+TSA组;与正常对照组:*P＜0.05;与I/Ｒ组比较:#P＜0.05图2细胞LDH活性检测1:正常对照组;2:I/Ｒ组;3:I/Ｒ+TSA组;与正常对照组:*P＜0.05;与I/Ｒ组比较:#P＜0.052．3Westernblot检测结果与正常对照组相比，I/Ｒ组细胞HDAC3蛋白表达显著升高(t=6.23，P＜0.05)，I/Ｒ+TSA组明显低于I/Ｒ组(t=5.06，P＜0.05)，差异有统计学意义。见图3。2．4qＲT-PCＲ检测HDAC3mＲNA的表达与正常对照组比较，I/Ｒ组中HDAC3mＲNA表达明显增加(t=10.13，P＜0.05)，而I/Ｒ组中HDAC3蛋白表达高于I/Ｒ+TSA组(t=7.85，P＜0.05)，差异有统计学意义。见图4。3讨论本研究通过检测心肌细胞增殖活性、细胞外LDH含量证实了缺血再灌注对心肌细胞活力的影响。结果显示I/Ｒ组、I/Ｒ+TSA组细胞增殖活力明安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017May;52(5)·675·
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图片说明： ?s藊±s表示，组间比较采取两样本t检验，多组均数比较应采用方差分析，检验水准P＜0.05差异有统计学意义。2结果2．1MTT结果显示与正常对照组相比，I/Ｒ组细胞增殖活性明显降低(t=4.38，P＜0.05)，I/Ｒ+TSA组增殖活性明显低于正常对照组(t=3.84，P＜0.05)，但高于I/Ｒ组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见图1。2．2LDH含量检测与正常对照组(24.52±2.34)相比，I/Ｒ组(75.13±5.22)细胞培养液LDH含量明显增高(t=6.35，P＜0.05)，I/Ｒ+TSA组明显低于I/Ｒ组(53.23±3.86)(t=3.76，P＜0.05)，差异有统计学意义。见图2。图1MTT法检测细胞活性1:正常对照组;2:I/Ｒ组;3:I/Ｒ+TSA组;与正常对照组:*P＜0.05;与I/Ｒ组比较:#P＜0.05图2细胞LDH活性检测1:正常对照组;2:I/Ｒ组;3:I/Ｒ+TSA组;与正常对照组:*P＜0.05;与I/Ｒ组比较:#P＜0.052．3Westernblot检测结果与正常对照组相比，I/Ｒ组细胞HDAC3蛋白表达显著升高(t=6.23，P＜0.05)，，I/Ｒ+TSA组明显低于I/Ｒ组(t=5.06，P＜0.05)，差异有统计学意义。见图3。2．4qＲT-PCＲ检测HDAC3mＲNA的表达与正常对照组比较，I/Ｒ组中HDAC3mＲNA表达明显增加(t=10.13，P＜0.05)，而I/Ｒ组中HDAC3蛋白表达高于I/Ｒ+TSA组(t=7.85，P＜0.05)，差异有统计学意义。见图4。3讨论本研究通过检测心肌细胞增殖活性、细胞外LDH含量证实了缺血再灌注对心肌细胞活力的影响。结果显示I/Ｒ组、I/Ｒ+TSA组细胞增殖活力明安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017May;52(5)·675·
【作者单位】： 安徽医科大学第二附属医院心胸外科安徽医科大学心血管病研究中心
【基金】：国家自然科学基金项目(编号:81570295) 安徽省科技攻关项目(编号:1501041148) 安徽省高校自然科学研究项目(编号:KJ2015A320)
【分类号】：R54

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2513225