睾酮与男性冠状动脉钙化的相关性分析及其对大鼠血管钙化的影响

发布时间：2020-05-21 17:54

【摘要】：研究背景:血管钙化主要是在动脉的内膜和中膜层发生的磷酸钙沉积现象。发生在内膜层的钙化可见于动脉粥样硬化纤维脂质斑块及其周围病变中,此类钙化能通过血管内超声观察到。钙化发生在中膜层(又称作Monckeberg钙化),多见于慢性肾病、2型糖尿病及晚期衰老患者,且与该类患者的全因死亡率及心血管死亡率有关~([1-2])。血管钙化涉及许多临床疾病的进展过程。在大动脉例如主动脉中血管内膜钙化可导致脉率增加和收缩期高血压从而增加心脏负荷,另外钙化的主动脉还会引起收缩期回流左心室的血流量增加,最终导致冠状动脉灌注不足及左心室肥厚。血管内膜钙化发生在冠状动脉可导致冠状动脉狭窄或冠状动脉粥样硬化斑块破裂最终引起心肌梗死或心肌缺血,并且可能导致心源性猝死。皮肤和其他器官小动脉钙化可导致局部梗塞和局部缺血~([3])。所有Framingham风险因素,包括高血压、糖尿病、高脂血症、年龄、吸烟等都可能会加剧内膜及中膜钙化。血管钙化是心血管病死亡的独立预测因子,也是冠心病和卒中发病的重要预测指标。随着年龄的增长,睾酮水平降低是老年男性中众所周知的一种名为“低T”,“更年期”或性腺机能减退的疾病。观察性研究显示低内源性睾酮水平和心血管代谢特征(血压升高,血脂异常,胰岛素抵抗,动脉粥样硬化,血栓形成)之间存在关联,并且会增加总体和心血管(CV)死亡率。睾酮与心血管疾病相关性研究中混杂着各种影响因素,如糖尿病,高血压,烟草,酒精等,这使睾酮与心血管疾病相关性研究更加复杂化。目前多项动物模型实验中睾酮水平与心血管系统之间的关联性是多重的,各项实验结果相互矛盾。一些横断面研究表明,较低的内源性睾酮水平与血管内膜、中膜厚度增加有关,与传统的CV风险因素无关。在病例对照研究中,与没有冠心病的对照组相比,已确诊冠心病的患者睾酮水平显著降低,且冠状动脉病变的严重程度随着睾酮水平的降低而增加。相反,有研究发现睾酮替代治疗(TRT)会增加心血管风险。目前人们对低睾酮的定义还缺乏一个统一的标准,相关实验中潜在的混杂因素及样本量大小均会影响实验结果准确性。本研究主要先通过检测冠状动脉钙化与非钙化患者血清睾酮水平,探讨睾酮与冠状动脉钙化的相关性。同时检测潜在混杂因素(如高血压、糖尿病、血脂、尿酸等)与冠状动脉钙化的相关性,进一步分析出睾酮对心血管疾病的影响。再通过尼古丁和维生素D3建立大鼠血管钙化模型,外源性睾酮干预大鼠,采用Western blot法检测钙化相关蛋白OPN、BMP4表达水平。研究外源性睾酮对尼古丁和维生素D3诱导的大鼠主动脉血管钙化的影响。研究目的:1.探讨男性血清睾酮水平与冠状动脉钙化的相关性;2.阐明睾酮对维生素D3和尼古丁诱导的大鼠主动脉血管钙化的影响。研究方法:1.收集患者血清标本,检测睾酮水平:收集2016年12月到2017年9月行冠状动脉CTA检查的72例住院男性患者血清标本,离心机3000转离心10分钟,于-20°C冻存待测睾酮水平。根据冠状动脉CTA检查结果将其分为两组,其中无冠状动脉钙化组(即对照组)32例,冠状动脉钙化组40例。采集该72位男性患者本次入院的一般临床资料(如年龄、高血压、糖尿病、吸烟、尿酸、总胆固醇、LDL、HDL、甘油三酯、肌酐、CRP、BMI)。采用SPSS23.0软件对各项指标与冠状动脉钙化的相关性进行统计分析,并采用logistic多元统计分析校正混杂因素对研究的影响,探讨男性血清睾酮水平与冠状动脉钙化的相关性。2.建立经典大鼠血管钙化模型:将雄性SD大鼠随机分为四组(钙化组、钙化+低睾酮组、钙化+高睾酮组、对照组),每组8只。1.除对照组外其余三组均在实验第一天8:00给予维生素D3(30 0000U/kg)肌肉注射,并予尼古丁(25mg/kg)灌胃,下午18:00再次给予同样剂量的尼古丁灌胃一次;2.对照组:给予等量无水乙醇肌注和花生油灌。8周后予5%水合氯醛麻醉后心脏采血,处死。制备大鼠主动脉病理切片观察钙盐沉积情况,检测钙化相关因子。3.外源性睾酮干预后检测钙化相关指标:实验第二天起,每隔一天分别给予1mg/kg(钙化+低睾酮组)、2mg/kg(钙化+高睾酮组)睾酮肌肉注射,钙化组及对照组给予等量的无水乙醇肌肉注射,共给药8周。8周后处死(同上)并用Elisa法测定大鼠血清睾酮和骨形态发生蛋白4(BMP-4)含量,采用试剂盒检测血管组织钙离子及碱性磷酸酶(ALP)含量,蛋白免疫印迹分析(Western blot)检测主动脉血管组织BMP-4、骨桥蛋白(OPN)表达水平,Vonkossa和茜素红染色观察钙盐沉积情况。研究结果:1.男性睾酮水平与冠状动脉钙化呈负相关:对72位住院男性患者的基本临床信息进行分析。与对照组相比,年龄、吸烟、尿酸比较差异有统计学意义(P0.05),其余指标(高血压、糖尿病、总胆固醇、LDL、肌酐、BMI、HDL、CRP)差异无统计学意义。冠状动脉钙化患者较非冠状动脉钙化患者血清睾酮水平明显降低(P0.01),logistic单因素回归分析睾酮与冠状动脉钙化的相关性P0.01,差异有统计学意义,logistic多因素回归分析校正混杂因素后,睾酮与冠状动脉钙化的相关性P0.05,差异有统计学意义。2.成功建立大鼠血管钙化模型:Vonkossa染色及茜素红染色均可见钙化组主动脉血管中膜大量黑色钙盐沉积物,而对照组血管壁光滑完好,未见明显黑色钙盐沉积物。钙离子检测试剂盒检测主动脉血管钙离子含量,钙化组钙离子含量较对照组显著升高P0.01。即钙化模型建立成功。3.外源性睾酮能一定程度上减轻维生素D3和尼古丁诱导的大鼠主动脉血管钙化:Vonkossa染色及茜素红染色可见钙化组血管中膜出现大量黑色颗粒样钙盐沉积,而低睾酮组、高睾酮组均见少量钙盐沉积,对照组无钙盐沉积。试剂盒检测钙含量、ALP含量,钙化组、钙化+低睾酮组、钙化+高睾酮组、对照组依次降低(P0.05)。Western blot检测钙化相关蛋白BMP-4、OPN的表达水平,钙化组表达水平最高,低睾酮组及高睾酮组较低,对照组较前两者低,各组表达差异有统计学意义(P0.05)。综上所述,外源性睾酮能在一定程度上减轻维生素D3和尼古丁诱导的大鼠主动脉血管钙化。研究结论:1.男性血清睾酮水平与冠状动脉钙化呈负相关;2.外源性睾酮能一定程度上减轻维生素D3和尼古丁诱导的大鼠主动脉血管钙化。
【图文】：

图 1. 冠脉 CTA 观察血管钙化情况Figure 1. Coronary calcification observed by coronary CTA2.3 检测冠状动脉钙化和非钙化男性患者血清睾酮水平（1）按顺序取出 36 例患者血清样本（72 个样本分两次检测），放入 37°C 恒

图 2. 两组样本血清睾酮水平比较Figure 2. Comparison of serum testoste3.3. 男性睾酮水平与冠状动脉钙化呈将 13 个钙化相关因素（年龄、尿酐、CRP、BMI、高血压、糖尿病、析，所得钙化组和非钙化组年龄、吸烟（见表 2）。再将存在差异的 4 个影响
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R541.4

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 陈雪;赵全明;聂毛晓;张学慧;闫云峰;;冠状动脉钙化的形成、检测及治疗新进展[J];中国循证心血管医学杂志;2019年01期

2 沈红良;刘世宏;李娜;;血清γ-谷氨酰转移酶水平与冠状动脉钙化的关系分析[J];中国循证心血管医学杂志;2018年03期

3 陈林;;冠状动脉钙化的研究和治疗新进展[J];中外医学研究;2018年20期

4 卢锷英;黄莉;;透析治疗患者冠状动脉钙化的危险因素分析[J];广西医科大学学报;2018年08期

5 王忠宇;;心脏扫描:为何需要以及何时应考虑[J];心血管病防治知识(科普版);2017年06期

6 段培林;张爱枝;;慢性肾脏病患者血清成纤维细胞生长因子23水平及其与冠状动脉钙化的关联研究[J];检验医学与临床;2018年21期

7 黄山;曾庆娜;刘志琴;王荣品;;多种心脏标志物与冠状动脉钙化积分的关系及其诊断价值探讨[J];重庆医学;2016年35期

8 游学文;孙伏清;陈平;陈启光;陈建文;;冠心病患者血清碱性磷酸酶与冠状动脉钙化程度的相关性研究[J];中西医结合心血管病电子杂志;2015年26期

9 范群华;;冠状动脉钙化旋磨术中并发症的处理和护理对策探析[J];人人健康;2016年22期

10 ;多坐1小时,冠状动脉钙化负担增14%[J];保健医苑;2015年07期

相关会议论文 前10条

1 何斌;林其昌;;阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与冠状动脉钙化积分的相关性[A];中国睡眠研究会第十届全国学术年会汇编[C];2018年

2 洪东煌;余惠珍;林帆;朱鹏立;;冠状动脉钙化相关因素及检出意义[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年

3 毕智敏;余毅;;维持性血液透析患者冠状动脉钙化危险因素及硫代硫酸钠的干预作用[A];中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编[C];2018年

4 张剑;韩雅玲;荆全民;王效增;马颖艳;王耿;刘海伟;王斌;徐凯;;冠状动脉钙化积分与冠心病危险因素的相关性研究[A];中国心脏大会（CHC）2011暨北京国际心血管病论坛论文集[C];2011年

5 袁伟杰;郭云珊;梅小斌;于青;刘智辉;付鹏;孙莉静;崔若兰;;血液透析患者冠状动脉钙化引起心脏结构功能改变及相关因素分析[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年

6 鲍宏达;汪年松;;CKD患者冠状动脉钙化的危险因素研究[A];中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2015年学术年会资料汇编[C];2015年

7 蔡卫东;廉秀花;高梅;崔连群;;冠状动脉旋磨术联合低压球囊成形术治疗老年冠状动脉钙化病变[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年

8 俞高龙;;CT对冠状动脉钙化的评价[A];第四届全国心功能学术研讨会论文摘要集[C];1994年

9 鲍宏达;汪年松;;CKD与非CKD患者冠状动脉钙化发生情况的比较研究[A];中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编[C];2018年

10 鲍宏达;汪年松;;CKD患者冠状动脉钙化的危险因素分析[A];中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编[C];2018年

相关重要报纸文章 前6条

1 张中桥;电子束CT检测可早期预测冠心病[N];中国医药报;2005年

2 北京大学人民医院心内科主任医师 胡大一;冠状动脉钙化与冠心病[N];保健时报;2008年

3 黄灿　编译;心血管疾病风险预测：冠状动脉钙化优于C反应蛋白[N];医药经济报;2011年

4 ;新术式破解老难题[N];健康时报;2018年

5 张中桥;电子束CT检测可早期预测冠心病[N];医药经济报;2005年

6 王萌 编译;三方法预测心脏病[N];健康时报;2010年

相关博士学位论文 前2条

1 曹慧丽;人群冠状动脉钙化研究[D];北京协和医学院;2013年

2 杜捷夫;人类免疫缺陷病毒感染与可卡因应用致动脉粥样硬化亚临床变化的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 何斌;阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与冠状动脉钙化积分的相关性[D];福建医科大学;2018年

2 罗昊;中老年患者淋巴细胞/单核细胞比值与冠状动脉钙化的相关性分析[D];南方医科大学;2019年

3 王倩;睾酮与男性冠状动脉钙化的相关性分析及其对大鼠血管钙化的影响[D];安徽医科大学;2019年

4 曹平平;多层螺旋CT冠状动脉钙化积分在冠心病诊断的应用及其与心功能评价的相关性[D];兰州大学;2013年

5 苏亚洲;阻塞性睡眠呼吸暂停与冠状动脉钙化的相关性研究[D];桂林医学院;2018年

6 李如刚;多模型迭代重建算法ASiR-V在冠状动脉钙化积分扫描中应用的研究—体模实验和临床验证[D];江苏大学;2018年

7 文杨;低钙透析液对维持性血液透析患者冠状动脉钙化的影响及安全性[D];重庆医科大学;2017年

8 卢锷英;透析患者冠状动脉钙化的危险因素分析[D];广西医科大学;2016年

9 赵小瑞;同型半胱氨酸、碱性磷酸酶与冠状动脉钙化的相关性分析[D];宁夏医科大学;2015年

10 鲁鹏;冠状动脉钙化的研究和治疗新进展[D];重庆医科大学;2016年

，

本文编号：2674674