超声靶向破碎微泡对心肌梗死犬心肌微环境的影响

发布时间：2020-06-04 07:04

【摘要】：为了研究超声靶向破碎微泡对犬心肌梗死模型局部心肌微环境的影响。将10只犬随机分为实验组与对照组,每组5只犬,结扎犬左前降支,建立心肌梗死模型。建立心肌梗死模型后1周,将实验组每只模型犬用脉冲超声(强度为1.0 W/cm2,频率为1 MHz)经胸辐照心肌,辐照时间共为10 min,同时静脉注入2 m L超声微泡。按照上述方法,每隔2 d处理一次,一共处理3次。对照组中的模型犬不经预处理。在所有犬心肌梗死模型建立后两周左右处死所有实验犬,取出心脏,于心肌梗死周边区域选取相应心肌组织,并送检。所取组织均采用免疫组织化学染色法、Western blotting法及定量实时PCR法分别从蛋白以及基因水平测量局部心肌组织内VCAM-1、VEGF、SDF-1和IL-1β的含量,从而探讨超声靶向辐照破碎微泡对犬心肌梗死模型局部心肌微环境的影响。免疫组织化学染色法及Western blotting法从蛋白水平定性和半定量观察到实验组中梗死周边区心肌分泌的VCAM-1、VEGF、SDF-1和IL-1β量明显多于对照组心肌梗死周边区;定量实时PCR法从基因水平定量分析检测显示实验组内梗死周边区心肌分泌VCAM-1、VEGF、SDF-1和IL-1β明显高于对照组中心肌梗死周边区(p0.05)。采用一定量的超声被动靶向辐照破碎微泡能够引发心肌内源性生物活性物质的分泌,促进VCAM-1、VEGF、SDF-1和IL-1β的高表达,从而使局部心肌微环境得到一定改变,有利于干细胞移植治疗缺血性心脏病。
【图文】：

RT-qPCR分析可以观察到经过超声辐照破碎微泡的基础，心肌局部组织分泌的有利细胞因子VCAM-1量提高了6倍，SDF-1与VEGF均提高了4倍多，而有害细胞因子IL-1β提高接近5倍(图3)。因此，在明显提高粘附因子、趋化因子和血管生长因子有利于干细胞的贴壁、迁移以及分化增殖的情况下，又不至于过度的炎性细胞因子的产生损害干细胞。经研究发现一定量的超声靶向辐照破碎微泡处理后能够精准的改变心肌梗死区域的微环境，是有利于干细胞迁移、存活、分化和增殖的。2讨论本试验结果显示对心肌梗死犬模型建立一周图1实验组与对照组各心肌组织免疫组织化学染色(×400)注:实验组中图(A~D)中阳性棕黄色颗粒均较对照组中图(a~d)明显增多;实验组中VEGF,SDF-1,VCAM-1,IL-1均呈强阳性表达Figure1Theimmunohistochemicalstainingofexperimentalgroupandthecontrolgroup(×400)Note:Immunohistochemistrystudyshowedhigherpositiveex-pression(A~D)ofVEGF,SDF-1,VCAM-1,IL-1thanthatintreatmentgroup(a~d);HigherpositiveexpressionofVEGF,SDF-1,VCAM-1,IL-1intreatmentgroupthanthatincontrolgroup图2Westernblotting检测细胞因子表达注:实验组中各细胞因子的条带表达灰度均比对照组的强Figure2WesternblottinganalysescytokinesexpressionNote:Higherexpressionofthesecytokinesintheexperimentgroupwashigherthanthatinthecontrolgroup图3实时定量PCR检测细胞因子和生长因子注:实验组中各细胞因子的量表达明显比对照组多(p<0.05)Figure3RT-qPCRmeasurementofcytokinesandgrowthfactorsNote:Theexpressionofcytokinesofdifferentcellsintheexper-imentgroupwassignificantlyhighe

图1实验组与对照组各心肌组织免疫组织化学染色(×400)注:实验组中图(A~D)中阳性棕黄色颗粒均较对照组中图(a~d)明显增多;实验组中VEGF,SDF-1,VCAM-1,IL-1均呈强阳性表达Figure1Theimmunohistochemicalstainingofexperimentalgroupandthecontrolgroup(×400)Note:Immunohistochemistrystudyshowedhigherpositiveex-pression(A~D)ofVEGF,SDF-1,VCAM-1,IL-1thanthatintreatmentgroup(a~d);HigherpositiveexpressionofVEGF,SDF-1,VCAM-1,IL-1intreatmentgroupthanthatincontrolgroup图2Westernblotting检测细胞因子表达注:实验组中各细胞因子的条带表达灰度均比对照组的强Figure2WesternblottinganalysescytokinesexpressionNote:Higherexpressionofthesecytokinesintheexperimentgroupwashigherthanthatinthecontrolgroup图3实时定量PCR检测细胞因子和生长因子注:实验组中各细胞因子的量表达明显比对照组多(p<0.05)Figure3RT-qPCRmeasurementofcytokinesandgrowthfactorsNote:Theexpressionofcytokinesofdifferentcellsintheexper-imentgroupwassignificantlyhigherthanthatinthecontrolgroup(p<0.05)超声靶向破碎微泡对心肌梗死犬心肌微环境的影响TheChangesofMyocardialMicroenvironmentInducedbyUTMDinaCanineMyocardialInfarctionModel4530

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