柚皮素调节肾素-血管紧张素系统平衡改善大鼠高血压肾损害

发布时间：2020-06-12 07:31

【摘要】：研究背景柚皮素,是一种天然的二氢黄酮类化合物,具有抗炎和抗氧化功能,在心血管疾病、糖尿病、神经系统病变和癌症等多种疾病中有保护作用。我们的前期研究结果发现柚皮素抑制大鼠心肌组织血管紧张素转换酶(ACE)的表达,阻止高血压左室肥厚的发生。研究目的肾脏是高血压的重要靶器官之一,本研究旨在探索柚皮素在高血压肾损害中的作用,并初步探讨其机制。实验方法使用SD大鼠,采用两肾一夹(two-kidney,one-clip,2K1C)手术方法建立肾血管性高血压大鼠模型,连续给予柚皮素(200 mg/kg体重/天)或等体积的生理盐水灌胃10周,对照组大鼠实施假手术加生理盐水灌胃。持续监测血压和24小时尿白蛋白水平,在实验结束时,通过组织病理学、酶联免疫吸附(ELISA)法、实时定量PCR、免疫组化和Western blot分别检测未夹侧肾脏病理变化、血浆血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和血管紧张素1-7(Ang 1-7)水平,以及肾组织局部肾素-血管紧张素系统(RAS)主要成分的基因表达。实验结果实验结束时,2K1C手术+生理盐水灌胃组较对照组血压显著升高(163.2±15.3mmHg 比 108.2±1.7mmHg,p=0.0015),24小时尿白蛋白明显增加(20.51±10.63mg比1.356±0.4023 mg,p0.001),其未夹侧肾脏出现肾小球系膜扩张、间质纤维化和肾内小动脉壁增厚的病理变化。柚皮素灌胃显著改善了手术大鼠未夹侧肾脏的病理损害,未有效减少24小时尿白蛋白(12.85±10.38mg比20.51±10.63mg,p=0.62),对血压无明显影响(182.6±19.59mmHg 比 163.2±15.3 mmHg,p=0.27)。与假手术大鼠相比,2K1C大鼠的血浆AngⅡ水平升高(13.27±1.78pg/ml1比7.20±0.48pg/ml,p=0.011)、未夹侧肾脏组织Ang Ⅱ2型受体(AT2R)mRNA表达下调、ACE蛋白表达增加、ACE2蛋白表达减少、ACE/ACE2蛋白比值上调、肾髓质AT2R的蛋白表达减少、皮质和髓质的AT1R/AT2R蛋白比值均升高,这些变化均被柚皮素治疗显著抑制。结论本研究中,柚皮素抑制肾血管性高血压大鼠循环及肾脏局部RAS的表达失衡,减轻高血压肾损害。柚皮素相关药物有望成为高血压肾病新的治疗方法。
【图文】：

尿白蛋白排泄率,组间,心率,柚皮素

在术后第６周开始，直到第１０周，２Ｋ１Ｃ组大鼠的２４小时尿白蛋白排泄量较逡逑对照组显著增加（第邋１０邋周：２０．５１±１０．６３ｍｇ邋比邋１．３５６±０．４０２３邋ｍｇ，ｐ＜０．００１），逡逑柚皮素治疗有抑制尿白蛋白排泄的趋势（图３，１２．８５±１０．３８ｍｇ，比２Ｋ１Ｃ组，／；＝逡逑０．６２）。逡逑Ａ逦ＳＢＰ逦Ｂ逦ＨＵ逡逑２００．逦，逦逦，逦５５０－，逡逑Ｉ逦Ｓｈａｍ逦Ｓｌｉａｍ逡逑Ｔ邋Ｔ逦—４逦＋邋２Ｋ〗Ｃ逦－ｍ－邋２Ｋ１Ｃ逡逑４００－逡逑５０－Ｕ￣￣．￣．￣．￣ｉ￣．邋．邋．￣．￣？－逦３５０－Ｌ－．￣．￣．￣．￣．￣．￣￣．￣ｉ￣．￣ｒ－逡逑０逦１逦２逦３逦４邋Ｓ邋６逦７逦８逦９逦１０逦０１２３４５６７８９逦１０逡逑Ｔｉｍｅ／ｗｅｃｋｓ逦ｒＩ１ｍｅ／ｗｅｅｋｓ逡逑图１．各组间血压、心率的比较逡逑对照组、２Ｋ１Ｃ组和２Ｋ１Ｃ＋ＮＧＮ组的（Ａ）收缩压（ＳＢＰ）、（Ｂ）心率（ＨＲ）。横括号表逡逑示与假手术组对比有显著差异。每组ｎ＝８。数据表示为平均值土标准差。逡逑ＢＷ逡逑６Ｕ０－Ｉ逡逑－？－Ｓｌｉａｍ逡逑■＊－２Ｋ１Ｃ逡逑４０Ｕ－逦＾邋２Ｋ１Ｃ邋＋邋ＮＧＮ逡逑２００－逡逑（１－１—１邋．邋１邋１邋１邋邋邋邋邋．邋１邋．邋ｒ—逡逑０邋Ｉ邋２邋３邋４邋５邋ｆｔ邋７邋Ｓ邋９邋ＨＩ逡逑Ｔｉｍｅ／ｗｅｅｋｓ逡逑２

柚皮素,肾脏组织学,图片,肾小球硬化

用ＨＥ、Ｍａｓｏｎ三色和ＰＡＳ染色法对右侧（未夹侧）肾组织切片进行病理学检逡逑查，与对照组大鼠相比，２Ｋ１Ｃ组肾脏表现出肾小动脉壁增厚、间质纤维化和肾小逡逑球硬化，这些病理变化参数由于柚皮素治疗而得到减轻（图４Ａ）。假手术组未夹逡逑侧肾病理评分为０，邋２Ｋ１Ｃ组为５．９２±０．１４（与假手术组比较，／；邋＜邋０．００１），，２Ｋ１Ｃ＋ＮＧＮ逡逑组为３．３０±０．３２邋（与２Ｋ１Ｃ组比较，夕＜０．００１；图４Ｂ）。在１０周结束实验时，２Ｋ１Ｃ逡逑组未夹侧肾的重量较对照组明显增加，柚皮素处理组未见显著减轻（图５）。逡逑２３逡逑
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R544.1

【相似文献】