免疫相关性全血细胞减少症患者Th9细胞数量及功能研究

发布时间：2020-06-29 07:58

【摘要】：实验目的通过检测免疫相关性全血细胞减少症(IRP)患者外周血辅助性T细胞9(Th9)数量、细胞因子白细胞介素-9(IL-9)的水平,以及Th9细胞分化相关转录因子PU.1、BATF mRNA相对表达量。探究Th9细胞在IRP的发病机制中的作用,寻找IRP新的潜在的治疗靶点。材料和方法:选取2017年7月至2018年1月在天津医科大学总医院被诊断为IRP的患者有50例,其中初治组30例、缓解组20例,另外选取20名健康人作为对照组。采用流式细胞术检测各组外周血Th9细胞(CD3+CD4+IL-9+)占CD3+CD4+细胞百分比;ELISA法检测各组血清IL-9水平。RT-PCR方法检测各组CD4+细胞中Th9细胞分化相关转录因子PU.1,BATF的mRNA相对表达量。实验结果:1.流式细胞术测定IRP患者外周血Th9细胞(CD3~+CD4~+IL-9~+)占CD3~+CD4~+细胞百分率,IRP患者初治组为(2.73±1.96)%,缓解组为(1.21±0.86)%,对照的为(0.68±0.40)%。在IRP患者初治组中Th9细胞的百分率明显高于缓解组(p0.001),缓解组明显高于对照组(p0.05),初治组明显高于对照组(p0.01)。2.酶联免疫吸附试验法定量检测血清IL-9水平,在IRP患者初治组外血清IL-9水平为(183.91±112.42)pg/ml,缓解组为(105.96±64.79)pg/ml,对照组为(56.03±14.49)pg/ml;初治明显高于缓解组(p0.01),初治组明显高于对照组(p0.001),缓解组也明显高于对照组(p0.01)。3.RT-PCR方法检测外周血CD4~+细胞中PU.1、BATF mRNA的相对表达量,IRP初治组PU.1的相对表达量为117.30±82.33,缓解组为45.46±33.22,对照组为19.07±13.56;初治组PU.1的相对表达量明显高于缓解组(p0.001),初治组明显高于对照组(p0.01),缓解组明显高于对照组(p0.01);IRP初治组BATF的相对表达量为608.57±517.68,缓解组为238.89±206.80,对照组为134.71±113.31,初治组明显高于缓解组(p0.01),初治组明显高于对照组(p0.001),缓解组与对照组之间无显著性差异(p0.05)。4.IL-9水平与临床指标的相关性分析,IL-9水平与血红蛋白(p0.01,r=-0.457),红细胞计数(p0.05,r=0.467),血小板计数(p0.05,r=-0.297),白细胞计数(p0.05,r=-0.227)呈负相关;血清IL-9浓度与CD5~+CD19~+/CD19+细胞的百分比(p0.05,r=0.376)和CD19+细胞的百分比(p0.05,r=0.318)均呈正相关。5.Th9细胞占CD3~+CD4~+T细胞的百分比与临床指标的相关性分析,Th9细胞在外周血中占CD3~+CD4~+细胞的百分比与血红蛋白(p0.05,r=-0.366)、红细胞计数(p0.05,r=-0.364)、血小板计数(p0.05,r=-0.457)、白细胞计数(p0.05,r=-0.418)呈负相关。Th9细胞百分比与CD5~+CD19~+/CD19~+细胞的百分比(p0.05,r=0.377)和CD19~+细胞的百分比(p0.001,r=0.835)均呈正相关。结论:1.IRP患者外周血中Th9细胞占CD3~+CD4~+细胞的百分比较对照组显著增高;2.IRP患者外周血血清中IL-9水平明显高于对照组;3.IRP患者与Th9细胞相关转录因子PU.1和BATF的mRNA均明显高于对照组;4.IRP患者血清中IL-9水平与Hb、WBC、RBC、PLT呈负相关,与CD19~+细胞的百分比、CD5~+CD19~+/CD19~+细胞的百分比呈正相关;5.IRP患者外周血中Th9细胞占CD3~+CD4~+细胞的百分比与Hb、WBC、RBC、PLT呈负相关,与CD19~+细胞的百分比、CD5~+CD19~+/CD19~+细胞的百分比呈正相关。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R558.2
【图文】：

天津医科大学硕士学位论文16图-2 流式细胞术中TH9细胞(CD3+CD4+IL-9+)的流式示意图(2A和2B为初治者；2C和2D为缓解者，2E和2F为对照者）

初治 缓解 对照0100200300400500*******IL-9(pg/ml)图-3 外周血血清中IL-9水平CD4+细胞磁珠分选纯度测定如图-4，FCM检测免疫磁珠分选CD4+细胞的纯度达到98.21%。

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本文编号：2733625