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利拉鲁肽对PCI术后患者血清致人脐静脉内皮细胞炎性反应的保护作用及其机制

发布时间:2020-07-04 12:17
【摘要】:目的及意义:探讨胰高血糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1)利拉鲁肽对PCI术后血清诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎症损伤的保护作用及相关机制。方法复苏并培养冻存的人脐静脉内皮细胞,取3-5代细胞进行实验,用PCI术后患者血清诱导HUVECs炎症损伤建立内皮细胞炎症反应模型并设阴性对照组,然后予利拉鲁肽进行干预并分组进行研究。以MTT法检测不同浓度利拉鲁肽干预的人脐静脉内皮细胞的活性,并计算各组细胞的增殖率、测LDH漏出率;硝酸还原酶法测定各组细胞培养液上清中的一氧化氮(NO)含量和比色法测定NOS活性;ELISA法测定处理后各组的培养上清液中细胞炎症因子MCP-1、s VCAM-1、s ICAM-1、IL-1和IL-6的含量;RT-q PCR检测细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达;Western-blot检测PKA和NF-κB p65活化水平。结果:PCI术后血清组的细胞炎症因子MCP-1、VCAM-1、ICAM-1、IL-1和IL-6,细胞凋亡因子基因Bcl-2和Bax表达较阴性对照组增加(P0.05),利拉鲁肽处理组与PCI术后血清组相比较,MCP-1、VCAM-1、ICAM-1、IL-1和IL-6,细胞凋亡因子Bcl-2和Bax明显下降(P0.05);PCI术后血清组的NO含量和NOS活性较阴性对照组明显下降(P0.05),利拉鲁肽处理组较PCI术后血清组的NO含量和NOS活明显上升(P0.05);利拉鲁肽处理组较PCI术后血清组的LDH泄漏率显著降低(P0.01);PCI术后患者血清组的NF-κB蛋白的活化水平明显上升,而PKA蛋白的活化水平明显降低;而利拉鲁肽能够抑制NF-κB p65的活化水平并且促进PKA的活化水平。结论:利拉鲁肽对PCI术后血清致人脐静脉内皮细胞的炎症损伤具有保护作用,且其作用是可能通过利PKA/NF-κB信号通路调节实现的。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R541.4
【图文】:

脐静脉内皮细胞


图 1 复苏培养至第 3 代的人脐静脉内皮细胞bilical vein endothelial cells recovered and cultured

脐静脉内皮细胞,细胞凋亡,文通,增殖率


图2 MTT法绘制的不同浓度利拉鲁肽处理对脐静脉内皮细胞增殖的影响Fig 2 Effects of different concentrations of liraglutide on the proliferation of HUVEC using MT表 1 不同浓度利拉鲁肽处理脐静脉内皮细胞 24 h 后对细胞增殖率的影响组别 增殖率0 nM 利拉鲁肽 22%1 nM 利拉鲁肽 30%10 nM 利拉鲁肽 39%100 nM 利拉鲁肽 55%2 利拉鲁肽对 PCI 术后静脉内皮细胞凋亡的影响为了进一步研究利拉鲁肽如何促进细胞的增殖以及利拉鲁肽处I 术后患者血清细胞凋亡的影响,本论文通过对 PCI 术后不同时间患行利拉鲁肽干预处理,并对处理 24 h 和 48 h 后的细胞凋亡情况进

【参考文献】

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本文编号:2741119

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