下肢深静脉血栓患者华法林稳态剂量的研究及预测剂量模型的建立

发布时间：2020-07-25 09:15

【摘要】：[目的]1.研究昆明地区汉族人群下肢深静脉血栓患者是否存在细胞色素P4502C9(CYP2C9)基因和维生素K环氧化物还原酶复合体1(VK0RC1)基因的多态性。2.基于对患者VK0RC1和CYP2C9基因多态性的研究,探讨其多态性对下肢深静脉血栓患者华法林稳态剂量的影响。3.建立当地下肢深静脉血栓患者华法林的预测剂量给药模型,为安全使用剂量的估算提供依据。[方法]1.162例服用华法林抗凝治疗的下肢深静脉血栓(LEDVT)患者为研究对象,其中女性患者66例,男性患者96例,年龄中位数为58岁。采用扩增阻滞突变体系-聚合酶链式反应技术(ARMS-PCR)检测患者血液中CYP2C9*3(1075A/C)和 VK0RC1-1639 G/A 基因的多态性。2.记录患者年龄、性别、身高、体质量、国际化标准比率(INR)、体质指数(BMI)等资料。3.采用相关性分析方法,探讨临床特征与华法林个体剂量的关系,综合患者的VK0RC1和CYP2C9基因型、年龄、性别、体质量、身高、INR值及华法林的应用情况进行多元逐步回归分析建立预测剂量模型。4.另外选取20例患者,采用研究所得的预测剂量模型用药,观察疗效。[结果]1.162例研究对象VK0RC1基因-1639G/A位点的AA、AG、GG型分别为85.19%(138)、13.46(22%)、1.350%(2),其中AA型华法林稳态剂量低于AG型和GG型。2.162例研究对象CYP2C9*3(1075A/C)基因的AA、AC基因型分别为93.21%(151)、6.79%例(11),其中AC型华法林稳态剂量低于AA型。3.CYP2C9*3(1075A/C)和VKORC1-1639G/A基因型与等位基因的频率分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P0.05)。4.相关性分析显示:患者的年龄、体质量、CYP2C9和VKORC1基因多态性与华法林的稳态剂量相关。5.预测剂量模型:华法林剂量=3.401-0.027×年龄+0.015×体质量-0.312×CYP2C9+0.979×(VKORC1-X1)+0.64X(VKORC1-X2),r=0.816。6.应用预测剂量模型所推荐使用的剂量疗效好,未出现不良事件的发生。[结论]1.昆明地区汉族下肢深静脉血栓患者存在VKORC1和CYP2C9基因的多态性。2.所入选患者中的预测剂量模型推荐的剂量与实际的稳态剂量具有显著相关性。3.应用所建立的预测剂量模型可较为准确地评估华法林的使用剂量。4.可运用预测剂量模型推荐的剂量进行试验性用药。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R543.6
【图文】：

酶切图

图１邋ＶＫ０ＲＣ１－１６３９Ｇ／Ａ基因的酶切结果逡逑注：Ｍ：ＤＮＡ邋Ｍａｒｋｅｒ邋Ｍ型１、３、４道ＧＧ型２道ＡＧ型６、７逡逑

酶切图,纯合子,野生型,杂合子

６泳道逡逑ＰＣＲ－ＲＦＬＰ邋确定邋ＣＹＰ２Ｃ９＊邋３邋基因和邋ＶＫ０ＲＣ１－１６３９Ｇ／Ａ邋基因的多态性，ＣＹＰ２Ｃ９＊逡逑３基因野生型纯合子ＡＡ型为１５４ｂｐ，为图２中第１、３、４、５、７泳道，突变杂逡逑合子ＡＣ型１０６ｂｐ、４８ｂｐ，为图２中第２、６泳道。ＶＫ０ＲＣ１－１６３９Ｇ／Ａ基因突变纯合逡逑子Ｍ型为２９０ｂｐ，为图１中第１、３、４、５泳道。突变杂合子ＡＧ型为２９０ｂｐ、１６８ｂｐ、逡逑１２２ｂｐ，如图１中第６、７泳道。野生型纯合子ＧＧ型为１６８ｂｐ、１２２ｂｐ，为图１中逡逑第２泳道。将所有样本采用ＲＦＬＰ内切酶发进行检测，结果ＶＫ０ＲＣ１基因突变纯逡逑合子ＡＡ型有１３８例，突变杂合子ＡＧ型２２例，野生型纯合子ＧＧ型２例；ＣＹＰ２Ｃ９逡逑＊邋３基因野生型纯合子Ｍ型１５１例，突变杂合子ＡＣ型１１例。逡逑２．邋ＣＹＰ２Ｃ９邋＊邋３和ＶＫ０ＲＣ１－１６３９邋Ｇ＞Ａ基因型分类与等位基因频率结果逡逑经ＡＲＭＳ－ＰＣＲ检测，ＣＹＰ２Ｃ９邋＊邋＿邋３基因型有１５１例野生型纯合子ＡＡ型逡逑（９３．２１％）

华法林,显著相关,剂量,相关性分析

型在（ＶＫＯＲＣ１－Ｘ１）输入邋１，（ＶＫ０ＲＣｎ－Ｘ２）输入邋０；邋ＧＧ邋型（ＶＫＯＲＣ１－Ｘ１）输入邋０，逡逑（ＶＫ０ＲＣ１－Ｘ２）输入１。预测剂量与稳态剂量的差值为（０．２６５±０．２９９）邋ｍｇ／ｄ，逡逑相关系数为０．８１６，具有显著相关性，详见图３。逡逑２４逡逑

【参考文献】