miR-21及其靶基因调控Hcy诱导心肌重塑的研究

发布时间：2020-07-25 09:26

【摘要】：目的:通过3%蛋氨酸喂养大鼠,建立大鼠心力衰竭模型。探讨miR-21/PTEN及miR-21/PDCD4信号通路在同型半胱氨酸诱导心力衰竭中的作用,为心衰的诊断及治疗提供新的思路。方法:Wistar大鼠30只,随机分为实验组(3%Met)(n=15)与对照组(control)(n=15),3%Met组给予3%蛋氨酸饲料喂养,control组普通饲料喂养。两组均按需给予饲料,每日换水,每周记录大鼠体重,3%Met组与control组在相同环境下饲养。12周后,对大鼠进行心脏超声学检查,测量室间隔厚度(IVS)、左心室舒张末内径(LVDD)、左心室收缩末内径(LVSD)、计算左室射血分数(EF%)及缩短分数(FS%)。行血流动力学监测心率及血压。留取内眦静脉血,采用ELISA方法测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)与NT-pro BNP水平。留取大鼠心肌组织,进行HE染色、Masson染色、Tunel染色等病理学检查。对心肌组织进行分子生物学检查,应用RT-PCR的方法测定微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21),PTEN,PDCD4的mRNA表达水平,应用Western blot方法测定心肌组织中的PDCD4、PTEN蛋白的表达水平。结果:3%Met组大鼠逐渐出现皮毛暗淡稀疏、发黄、伴不同程度的脱毛、体重增长缓慢,甚至负增长。实验进行5周后3%Met组的体重及体重增长速度明显低于control组。12周后,3%Met组的体重及心脏重量指数(HWI)均低于control组,结果有统计学意义。心脏彩超结果表明3%Met组的EF%、FS%、IVS减低,LVDD及LVSD增加,差异具有统计学意义。血流动力学指标表明3%Met组的动脉血压下降,而左室内压及心率则无明显差异。ELISA结果显示3%Met组血浆Hcy及NT-proBNP浓度明显高于control组,差异有统计学意义。HE染色结果显示,3%Met组可见心肌排列紊乱,心肌间隙增大。Masson染色结果显示3%Met组纤维化增多,胶原容积分数较control组升高,有统计学意义。Tunel结果显示,两组均可发现凋亡细胞,3%Met组凋亡细胞增多,凋亡指数(AI%)高于control组,有统计学意义。Western blot结果显示3%Met组心肌组织中PTEN及PDCD4蛋白表达水平较control组明显上调。RT-PCR结果显示3%Met组miRNA-21的mRNA表达水平增高。PTEN及PDCD4的mRNA基因表达同其蛋白表达趋势一致,在3%Met组表达上调。结论:通过口服蛋氨酸诱发大鼠高同型半胱氨酸血症可导致大鼠出现心力衰竭。miRNA-21/PTEN和miRNA-21/PDCD4信号途径参与了Hcy致心力衰竭的调控。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R54
【图文】：

曲线,体重增长,大鼠,曲线

图 1-1.两组大鼠的时间体重增长曲线（纵坐标为体重，单位为克，横坐标为时间，单位为周）12 周结束后，3%Met 组平均体重显著低于 control 组，心脏重量指数显著高于 control 组。详见表 1-1。表 1-1 大鼠一般情况比较1.2.2 动物心脏彩超的结果心脏彩超经过统计后发现蛋氨酸喂养组大鼠的射血分数(EF%)，(FS%)，室间隔(IVS)厚度减低，左室收缩末径（LVDD）及左室舒张末径增加，具有统计学意义（P＜0.05）两组大鼠心脏彩超结果详见表 1-2，BW 0w(g) BW 12w(g) HW(mg) HWI(HW对照组（n=15） 216.6±2.9 474.4±12.8 655.2±17.3 1.3±0实验组（n=15） 211.6±2.4 407.1±19.2 661.5±17.3 1.6±0P 0.307 ＜0.05 0.278 ＜0.

硕士学位论文,彩超,实验组,对照组

天津医科大学硕士学位论文表 1-2 两组大鼠心脏彩超情况对照组（n=15）实验组（n=15） PIVS（mm） 1.76±0.26 1.35±0.07 ＜0.05LVDD（mm） 6.79±0.50 7.45±0.62 ＜0.05LVSD（mm） 3.86±0.64 4.88±0.41 ＜0.05FS（%） 43.40±6.60 34.45±4.32 ＜0.05EF（%） 72.76±7.30 61.68±5.72 ＜0.05

蛋氨酸,收缩压,内压,大鼠

图 1-3 心脏彩超注：A.control B.3%蛋氨酸1.2.3 血流动力学结果血流动力血指标显示，动脉血压相比较来看，3%Met 组收缩压（SBP）舒张压（DBP）较对照组大鼠收缩压减低，p＜0.05，具有统计学意义，左室收缩末内压（LVSP）左室舒张末内压（LVDP）心率（HR）等两组大鼠无差异，详见下表。表 1-3 两组大鼠血流动力学对比对照组（n=15）实验组（n=15） P 值HR （bpm） 347.15±26.13 350.2±27.49 0.818SBP(mmHg) 150.6±13.3 131.6±12.9 ＜0.05DBP（mmHg） 117.7±9.48 107.7±9.0 ＜0.05LVSP(mmHg) 151.7±16.1 137.7±17.1 0.104LVDP（mmHg） 11.7±7.7 10.1±6.9 0.663

【参考文献】